[發(fā)明專利]一種中藥植物山木通的組培快繁方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911068831.1
• 申請(qǐng)日: 2019-11-05
• 公開（公告）號(hào): CN110612906A
• 公開（公告）日: 2019-12-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 莫昭展
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 玉林師范學(xué)院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 44295 廣州海心聯(lián)合專利代理事務(wù)所(普通合伙)
• 代理人: 王洪娟

本發(fā)明公開了一種中藥山木通的組培快繁方法，包括依次進(jìn)行的如下步驟：獲取山木通的外植體、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、不定芽增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽；所述的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)操作的培養(yǎng)基包括：WPM培養(yǎng)基、3～4mg/L ZT、3～4mg/L CTK、20～30g/L蔗糖、3.5～4.5g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。本發(fā)明的誘導(dǎo)率達(dá)到了88％以上，移栽成活率達(dá)到了90％以上，實(shí)現(xiàn)了山木通的組培快繁。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)中植物組織培養(yǎng)的方法，具體來說是一種中藥植物山木通的組培快繁方法。

背景技術(shù)

毛茛科鐵線蓮屬植物是一類具有觀賞和藥用價(jià)值的植物，攀援性強(qiáng)，花型多變，花色豐富，花期長，也是優(yōu)良的垂直綠化材料。山木通(Clematis finetiana)為毛茛科鐵線蓮屬多年生藤本植物，分布于云南、四川、貴州(700-1200米)、河南雞公山、湖北、湖南(300-1200米)、廣東(200-800米)、廣西、福建(400-1000米)、江西(100-700米)、浙江(120-1200米)、江蘇南部、安徽淮河以南(100-900米)。中藥藥效為祛風(fēng)利濕，活血解毒。治風(fēng)濕關(guān)節(jié)腫痛，腸胃炎，瘧疾，乳癰，牙疳，目生星翳?；ㄆ?－5月，花色潔白，小而繁茂，栽培適應(yīng)性佳，但其自然結(jié)實(shí)率和種子繁殖系數(shù)均偏低。同時(shí)，山木通野生群體中存在花色、花型自然變異的單株，是優(yōu)良的觀賞種質(zhì)資源，唯有通過無性繁殖才能實(shí)現(xiàn)品種化。目前，對(duì)山木通的研究主要集中在化學(xué)成分及藥用價(jià)值方面，有關(guān)繁殖技術(shù)研究的報(bào)道較少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種中藥山木通的組培快繁方法，選擇山木通帶兩個(gè)側(cè)芽的莖段為外植體，經(jīng)不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、不定芽增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)以及移栽等步驟，其誘導(dǎo)率達(dá)到了88％以上，移栽成活率達(dá)到了90％以上，實(shí)現(xiàn)了山木通的組培快繁，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。

本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種中藥山木通的組培快繁方法，包括依次進(jìn)行的如下步驟：獲取山木通的外植體、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、不定芽增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽；所述的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)操作的培養(yǎng)基包括：WPM培養(yǎng)基、3～4mg/L ZT(玉米素)、3～4mg/L CTK(細(xì)胞分裂素)、20～30g/L蔗糖、3.5～4.5g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。在上述的中藥山木通的組培快繁方法中，所述的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)操作的方法為：將采集得到的作為外植體的山木通消毒后剪切成2.5～3cm的帶兩個(gè)側(cè)芽的莖段并接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，置于25℃,自然光培養(yǎng)40～50天即可誘導(dǎo)形成不定芽。

在上述的藥山木通的組培快繁方法中，所述的不定芽增殖培養(yǎng)操作所用到的增殖培養(yǎng)基包括：WPM培養(yǎng)基、3～4mg/L IAA(吲哚乙酸)、40mg/L腺嘌呤、20～30g/L蔗糖、3.5～4.5g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

在上述的中藥山木通的組培快繁方法中，所述的不定芽增殖培養(yǎng)操作具體為：將不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的不定芽切成長1.5～2.0cm的莖段并接種到增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)40～50天即可實(shí)現(xiàn)不定芽的增殖。

在上述的中藥山木通的組培快繁方法中，所述的生根培養(yǎng)操作所用到的生根培養(yǎng)基包括：MS培養(yǎng)基、1～2mg/L ETH(乙烯)、20～30g/L蔗糖、3～4g/L瓊脂、，pH為5.4～5.8。

在上述的中藥山木通的組培快繁方法中，所述的生根培養(yǎng)操作的方法為：從不定芽增殖培養(yǎng)得到增殖后的不定芽的基部切取2.0～3.0cm不定芽并接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)40～50天即能實(shí)現(xiàn)試管苗的生根。

在上述的中藥山木通的組培快繁方法中，所述的移栽操作的具體方法為：將經(jīng)生根培養(yǎng)操作得到的根系生長良好的試管苗在溫室大棚的自然光下煉苗10天，洗凈根部的培養(yǎng)基移栽于河沙中栽培成苗即得山木通種苗。

在上述的山木通的組培快繁方法中，不定芽增殖培養(yǎng)操作、生根培養(yǎng)操中培養(yǎng)條件均為：培養(yǎng)溫度為25～28℃，采用自然光進(jìn)行培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為100～1200lx。

有益效果：