[發明專利]控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因及其重組構建體和應用

在審

• 申請號: 201911061985.8
• 申請日: 2019-11-01
• 公開（公告）號: CN110684757A
• 公開（公告）日: 2020-01-14
• 發明（設計）人: 齊靜;齊建;劉坤;陳松嶺;王健;張菊
• 申請（專利權）人: 周口師范學院;周口市質量技術監督檢驗測試中心
• 主分類號: C12N9/50
• 分類號: C12N9/50;C12N9/14;C12N15/57;C12N15/55;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 41109 鄭州中原專利事務所有限公司
• 代理人: 霍彥偉;王喚霞

1.一種控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因，其核苷酸序列為SEQ ID NO.1，其基因開放閱讀框的核苷酸序列為SEQ ID NO.2，其cDNA編碼的氨基酸序列為SEQ ID NO.3。

2.一種重組構建體，其特征在于包括權利要求1的基因的核苷酸序列，所述構建體用的載體為用于克隆的pEasy-T1載體或者用于表達的Myc-pBA載體。

3.根據權利要求2所述的含控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因表達的重組構建體的制備方法，其特征在于：擴增核苷酸序列SEQ ID NO1，上游引物XbaIF5′-ACTCTAGAATGTTTTCTGCTGGAGAGG-3′，下游引物AatIIR 5′-ACGACGTCTGTTCTCTAAGGGGCATGACAGGA-3’；PCR 擴增產物純化后T4連接反應后至 pEasy-T1 載體上，轉化至E.coli DH5α感受態細胞中，得到克隆構建體pEasy-T1-RabGAP3。

4.根據權利要求2所述的含控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因表達的重組構建體的制備方法，其特征在于：將克隆載體pEasy-T1-RabGAP3質粒中含RabGAP3基因片段的DNA經XbaI和AatII雙酶切連接至植物表達載體Myc-pBA上，轉化至E.coli DH5α感受態細胞中，得到植物表達構建體pBA-RabGAP3。

5.如權利要求1所述的含控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因表達的構建體的轉基因農桿菌為LBA4404。

6.如權利要求1所述的含控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因表達的重組構建體在植物組織表達中的應用。

7.如權利要求5所述的含控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因表達的重組構建體在植物組織表達中的應用，其特征在于：所述植物組織為根、莖、葉、花、纖維、分蘗芽或種子。

8.如權利要求5所述的含控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因表達的重組構建體在植物組織表達中的應用，其特征在于：所述植物為單子葉植物或雙子葉植物。

9.如權利要求7所述的含控制囊泡發育的擬南芥RabGAP3基因表達的重組構建體在植物組織表達中的應用，其特征在于：所述單子葉植物為水稻、小麥、大麥、高粱或玉米，所述雙子葉植物為擬南芥、番茄、煙草、大豆或土豆。

10.一種功能類似蛋白，其特征在于：它的氨基酸序列與SEQ ID No.3所示的氨基酸序列具有不小于30%的同源性，該蛋白在培育早熟品種植物中的應用。