[發(fā)明專利]一種提高精液低溫保存品質(zhì)的精液稀釋液及其應(yīng)用方法

在審

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• 申請日: 2019-11-01
• 公開（公告）號: CN111053080A
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曾申明;從光雷;劉青;孫偉;楊峰
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京衛(wèi)平智業(yè)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11392
• 代理人: 張新利;謝建玲

本發(fā)明涉及畜牧領(lǐng)域，具體公開了一種提高精液低溫保存品質(zhì)的精液稀釋液及其應(yīng)用方法。本發(fā)明提供的精液稀釋液能夠顯著提高綿羊精液低溫保存時間和受胎率，精液在低溫下的有效保存時間能達(dá)到120小時，保存72小時內(nèi)的受胎率能達(dá)到90％以上。本發(fā)明提供的精液稀釋液制備簡單，成本低廉，應(yīng)用效果顯著，對動物不產(chǎn)生任何有害影響，可以在動物精液保存及相關(guān)的胚胎移植產(chǎn)業(yè)和胚胎工程中廣泛應(yīng)用，具有廣闊的市場前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及畜牧領(lǐng)域，具體地說，涉及一種提高精液低溫保存品質(zhì)的精液稀釋液及應(yīng)用方法。

背景技術(shù)

精液低溫保存技術(shù)能充分利用優(yōu)良種畜的遺傳資源，迅速擴(kuò)大畜群的良種比例和提高動物生產(chǎn)性能。同時，此技術(shù)也是治療哺乳動物不孕癥的有效輔助手段。精液稀釋液是精子的保護(hù)劑，對精液保存的效果有重要的影響。哺乳動物常用的精液稀釋液類型有檸檬酸一糖一卵黃類稀釋液、蔗糖類稀釋液和奶類稀釋液。它們一般都由維持滲透壓和pH緩沖的物質(zhì)、抑菌物質(zhì)和保護(hù)劑等組成。

羊的精液保存主要采用低溫和冷凍保存。低溫保存的優(yōu)點是精液在4℃條件下能長期保存，從而實現(xiàn)遠(yuǎn)距離運輸。目前，綿羊精液在48小時內(nèi)輸精后的情期受胎率與鮮精無明顯差異，而48小時以后輸精后的情期受胎率明顯降低。冷凍保存通常是將精液用特定溶液稀釋后包裝在0.25mL細(xì)管中，然后放入液氮中保存。綿羊凍精解凍后的直線前進(jìn)運動率在45％左右，人工授精后受胎率明顯低于鮮精和液態(tài)保存精液。主要原因是綿羊精子質(zhì)膜中含有高濃度的多不飽和脂肪酸，精子質(zhì)膜在冷休克和活性氧存在的情況下易發(fā)生氧化，冷凍會對精子質(zhì)量造成不可逆損傷，解凍后精子成活率較低，導(dǎo)致人工授精后受胎率低，相比較低溫保存方法有很大缺陷。在生產(chǎn)過程中，精液的液態(tài)保存具有較大的應(yīng)用前景。

我國是世界第一養(yǎng)羊大國，但總體生產(chǎn)性能低下，養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益較差。其主要原因是良種普及率低，生產(chǎn)群雜交利用不足。同期發(fā)情和人工授精是解決以上問題根本而有效的技術(shù)手段，其中精液的有效保存是關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)。

本發(fā)明提供了一種有效的綿羊精液低溫保存方法，對綿羊優(yōu)良品種培育和生產(chǎn)群批次化生產(chǎn)具有重要應(yīng)用價值。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明目的是提供一種提高精液低溫保存品質(zhì)的精液稀釋液及應(yīng)用方法。

為了實現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供一種提高精液低溫保存品質(zhì)的精液稀釋液，包括如下組分：

NaCl,0.065g；CaCl₂(H₂O)₂，0.006g；MgCl₂(H₂O)₆，0.008g；NaHCO₃，0.10g；葡萄糖，0.10～1.00g；果糖，0.100～0.99g；三羥甲基氨基甲烷Tris，1.00～1.60g；檸檬酸，0.90g；蒸餾水定容至100mL，pH調(diào)整到6.8后，進(jìn)行高壓滅菌；

室溫冷卻后加入抑菌物質(zhì)得到配制A液；

量取一定量的配制A液，在配制A液中加入卵黃，所述卵黃的加入量為總體積的2.5～10％，得到基礎(chǔ)稀釋液；

在每升基礎(chǔ)稀釋液中添加0.5g～10.0g的過氧化氫酶和2g～30g牛血清蛋白，充分混勻后，得到所述精液稀釋液，所述精液稀釋液于4℃保存；

在上述方案的基礎(chǔ)上，所述基礎(chǔ)稀釋液，含有如下成分：