[發明專利]一種灰黃霉素菌種固體培養基在審
| 申請號: | 201911050270.2 | 申請日: | 2019-10-22 |
| 公開(公告)號: | CN110669678A | 公開(公告)日: | 2020-01-10 |
| 發明(設計)人: | 曹鳳娟;張國銀;胡建華;張紅玉;付桂杰;閆雪春;叢立雙 | 申請(專利權)人: | 赤峰制藥股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;C12P17/04;C12R1/83 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 024000 內蒙*** | 國省代碼: | 內蒙;15 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 菌種 氯化鉀 工作效率高 固體培養基 磷酸二氫鉀 培養基表面 培養基培養 培養基配制 灰黃霉素 菌種發酵 硫酸亞鐵 土豆淀粉 原料配制 蔗糖 硫酸鎂 同步性 硝酸鈉 重量份 孢子量 菌落 孢子 瓊脂 光滑 接種 | ||
本發明公開了一種灰黃霉素菌種固體培養基,它由下述重量份比例的原料配制而成:土豆淀粉100~150份、蔗糖20~30份、磷酸二氫鉀2~4份、氯化鉀3~4份、硝酸鈉1~2份、硫酸鎂0.4~0.5份、硫酸亞鐵0.01~0.02份、瓊脂15~25份。本發明培養基表面光滑、硬度適中,接種均勻;由本發明培養基培養的菌種菌落飽滿,顏色白,形態圓,孢子量大,孢子同步性好,菌種發酵單位穩定;本發明培養基配制方便,簡單易學,工作效率高。
技術領域
本發明屬于菌種培養基技術領域,尤其是一種灰黃霉素菌種固體培養基。
背景技術
灰黃霉素(griseofulvin)屬芳香族衍生物類抗生素,是一種抗真菌抗生素。灰黃霉素普遍應用于臨床治療皮膚和角質層真菌感染;在農業植物保護方面也有著良好的應用前景。國內發酵生產灰黃霉素所使用的菌種均是我國自行篩選的野生型展青霉菌Penicillium patulum 4541菌株,經人工誘變而來的D~756菌種的后代N15~3~40。
目前,國內企業灰黃霉素工業生產菌種制備使用傳統的蔗糖配方培養基和PDA固體培養基。蔗糖配方培養基由下述重量百分比的原料配制而成:蔗糖3%、磷酸二氫鉀0.5%、氯化鉀0.4%、硝酸鈉0.2%、硫酸鎂0.05%、硫酸亞鐵0.001%、瓊脂2.5%。PDA固體培養基由下述重量百分比的原料配制而成:馬鈴薯20%,葡萄糖2%,瓊脂粉15~20%。培養基質量是灰黃霉素菌種制備工藝過程中的關鍵因素之一。傳統的蔗糖配方培養基培養周期長,硬度不穩定;傳統的PDA培養基配方中的組分馬鈴薯因品種、季節和產地不同等因素,導致品質有較大區別,也會影響灰黃霉素菌種穩定性。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的缺陷,提供一種灰黃霉素菌種固體培養基,由它培養的菌種質量穩定、菌種培養周期短、菌種發酵單位高。
本發明的技術方案是這樣實現的:一種灰黃霉素菌種固體培養基,它由下述重量份比例的原料配制而成:土豆淀粉100~150份、蔗糖20~30份、磷酸二氫鉀2~4份、氯化鉀3~4份、硝酸鈉1~2份、硫酸鎂0.4~0.5份、硫酸亞鐵0.01~0.02份、瓊脂15~25份。
進一步優化的技術方案,所述的灰黃霉素菌種固體培養基,它由下述重量份比例的原料配制而成:土豆淀粉120份、蔗糖20份、磷酸二氫鉀4份、氯化鉀3份、硝酸鈉1份、硫酸鎂0.4份、硫酸亞鐵0.02份、瓊脂20份。
本發明灰黃霉素菌種固體培養基的制備方法:按比例稱取各成份,用去離子水充分溶解后,定容至目的體積,最后調pH至5~6,更優選的調pH至5.5,分裝后,使用消毒釜在115~125℃溫度下滅菌20~30分鐘,待溫度降至60℃左右時,于無菌室中倒平板或擺斜面。
本發明和現有技術相比的優點為:
不使用馬鈴薯為培養基原料,克服了馬鈴薯品種、季節和產地不穩定因素的影響;培養周期由7天縮短至5天;本發明培養基表面光滑、硬度適中,接種均勻;由本發明培養基培養的菌種菌落飽滿,顏色白,形態圓,孢子量大,孢子同步性好,菌種發酵單位穩定;本發明培養基配制方便,簡單易學,工作效率高。
附圖說明
圖1本發明菌種和兩種傳統菌種成熟斜面菌苔菌落外觀;
圖1中:A為本發明培養基菌種成熟斜面菌苔菌落外觀,B為蔗糖配方培養基菌種成熟斜面菌苔菌落外觀,C為PDA固體培養基菌種成熟斜面菌苔菌落外觀。
圖2本發明菌種和兩種傳統菌種成熟斜面鏡檢情況;
圖2中:D本發明培養基斜面孢子,E為蔗糖配方培養基斜面孢子,F為PDA固體培養基斜面孢子。
具體實施方式
為使本發明的技術方案更加清楚,下面通過具體實施例和對比試驗對本發明作進一步地詳細描述。
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