[發明專利]抗TSPAN8單克隆抗體及其用途

有效

• 申請號: 201911045666.8
• 申請日: 2019-10-30
• 公開（公告）號: CN110734494B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 王紅霞;葛偉玉;楊光;朱容萱;馬培祥;周天浩;李軍建;許靜軒
• 申請（專利權）人: 上海市第一人民醫院
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 上海元好知識產權代理有限公司 31323
• 代理人: 賈慧琴;張靜潔

本發明公開了一種抗TSPAN8單克隆抗體及其用途，該抗體能與TSPAN8蛋白特異性結合；所述抗體的重鏈可變區由如SEQ ID NO：1所示的核酸序列或其同源性序列編碼；所述抗體的輕鏈可變區由如SEQ ID NO：2所示的核酸序列或其同源性序列編碼，可用于制備治療和/或預防由TSPAN8介導促進腫瘤細胞上皮間質轉化及干性增強的分子調控機制及關鍵分子靶點的疾病的藥物組合物。本發明提供的抗TSPAN8單克隆抗體具有高親和力，特異性強，穩定性好，且具有抑制乳腺癌細胞系的增殖和遷移能力，且可以抑制腫瘤的生長。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，具體涉及全人源的抗TSPAN8單克隆抗體及其用途。

背景技術

Tetraspanins又稱作四次跨膜蛋白超家族(TM4SF)，由33個家族成員組成，包括TSPAN8、與分化(CD)相關的CD63、CD37、CD53、CD81和CD9等。Tetraspanins家族共同特征是具有四個高度保守的膜跨域，在多種細胞功能中發揮重要生物學調控。

腫瘤的侵襲轉移和耐藥是導致臨床治療失敗、患者死亡的主要原因。腫瘤微環境(Tumor Microenvironment,TME)中，四次跨膜蛋白TSPAN8促進腫瘤細胞上皮間質轉化(Epithelial Mesenchymal Transition,EMT)及干性(Stemness)增強的分子調控機制及關鍵分子靶點。越來越多的證據表明，TSPAN8促進腫瘤細胞遷移，侵襲和轉移在多種類型的人類癌癥，包括卵巢癌和胃癌結腸直腸癌、肝癌、胰腺癌、神經膠質瘤等。

單克隆抗體藥物具有靶向性強、特異性高和毒副作用低等特點。以四次跨膜蛋白TSPAN8為靶標的單克隆抗體可以特異性與TSPAN8發生特異性結合，從而介導抗腫瘤治療效果。

全人源抗體是治療性抗體發展的主要方向，抗體庫技術的出現為人源抗體的制備篩選提供了良好的技術平臺。抗體庫技術繞過了以往單抗研制過程中必須的雜交瘤過程，甚至不需要經過免疫過程即可獲得各種抗體基因以及抗體分子片段。噬菌體抗體庫是最早出現也是目前應用最廣泛的抗體庫。噬菌體抗體庫根據抗體基因的來源分為免疫庫和非免疫庫，非免疫庫又天然庫、半合成庫和全合成庫。噬菌體抗體庫的篩選模擬了抗體親和力成熟的過程，將抗原包在固相介質上，加入待篩選的噬菌體抗體庫，通過數輪“吸附-洗滌-洗脫-擴增”的過程淘選到親和力特異的抗體。

目前，國內尚且缺乏具有高親和力的抗腫瘤效果的抗TSPAN8的全人源抗體。

發明內容

本發明的目的是針對TSPAN8的胞外段序列作為抗原，從全人源組合天然抗體庫中篩選出抗TSPAN8的單克隆抗體或其片段，該抗體具有高親和力、且能抑制乳腺癌細胞系的增值和遷移，具有抗腫瘤效果。

為了達到上述目的，本發明提供了一種抗TSPAN8的單克隆抗體及其應用。

本發明的第一方面，提供了一種抗體的重鏈可變區，編碼所述抗體的重鏈可變區的核酸序列如SEQ ID NO：1所示或其同源性序列。

本發明的第二方面，提供一種抗體的輕鏈可變區，編碼所述抗體的輕鏈可變區的核酸序列如SEQ ID NO：2所示或其同源性序列。

較佳地，所述抗體包括：單鏈抗體、雙鏈抗體。

較佳地，所述抗體為單克隆抗體。

較佳地，所述抗體為特異性抗TSPAN8蛋白的單克隆抗體。

較佳地，所述抗體還包含選自IgG1或IgG4亞型的重鏈恒定區和包含選自kappa的輕鏈恒定區。

本發明的第三方面，提供一種編碼上述的重鏈可變區和/或輕鏈可變區的多核苷酸。

本發明的第四方面，提供一種載體，其包含如第三方面所述的多核苷酸。