[發明專利]一種單管多重快速檢測沙眼衣原體、淋球菌及解脲脲原體的熒光PCR試劑盒

有效

• 申請號: 201911042924.7
• 申請日: 2019-10-30
• 公開（公告）號: CN110656189B
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發明（設計）人: 王義聰;李振紅;李靜靜;杜美;魯清月;付光宇;吳學煒;苗擁軍
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/36;C12R1/01
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

1.一種單管多重快速檢測沙眼衣原體、淋球菌及解脲脲原體的熒光PCR試劑盒，其特征在于，所述熒光PCR試劑盒包括PCR反應液、PCR啟動劑、陽性質控品、陰性質控品；

所述PCR啟動劑中各成分的濃度為：

1~5mM?Mn(OAc)₂、0.5~1.5mM?MgCl₂、0.05~0.2w/t%防腐劑；

所述PCR反應液中各成分的濃度如下：

1v/v%~20v/v%?DMSO、0.01v/v%~0.15v/v%Tween20、1v/v%~20v/v%甘油；10~100mM三(羥甲基)甲基甘氨酸、50~150mM乙酸鉀、0.1~0.5μM沙眼衣原體正向引物、0.1~0.5μM沙眼衣原體反向引物、0.1~0.5μM淋球菌正向引物、0.1~0.5μM淋球菌反向引物、0.1~0.5μM解脲脲原體正向引物、0.1~0.5μM解脲脲原體反向引物、0.1~0.5μM人GAPDH基因DNA正向引物、0.1~0.5μM人GAPDH基因DNA反向引物、0.05~0.2μM沙眼衣原體探針、0.05~0.2μM淋球菌探針、0.05~0.2μM解脲脲原體探針、0.01~0.1μM人GAPDH基因DNA探針、5~15U?DNA聚合酶、0.5~2UUNG酶、0.1~0.3mM?dATP、0.1~0.3mM?dGTP、0.1~0.3mM?dCTP、0.2~0.6mM?dUTP和0.05~0.2w/t%防腐劑；

所述檢測沙眼衣原體的引物由SEQ?ID?No：1所示的正向引物和SEQ?ID?No：2所示的反向引物組成；

所述檢測淋球菌的引物由SEQ?ID?No：3所示的正向引物和SEQ?ID?No：4所示的反向引物組成；

所述檢測解脲脲原體的引物由SEQ?ID?No：5所示的正向引物和SEQ?ID?No：6所述的反向引物組成；

所述檢測人GAPDH基因DNA的引物由SEQ?ID?No：7所示的正向引物和SEQ?ID?No：8所示的反向引物組成；

所述沙眼衣原體的探針序列如SEQ?ID?No：9所示；

所述淋球菌的探針序列如SEQ?ID?No：10所示；

所述解脲脲原體的探針序列如SEQ?ID?No：11所示；

所述人GAPDH基因DNA的探針序列如SEQ?ID?No：12所示。

2.根據權利要求1所述的熒光PCR試劑盒，其特征在于，所述DNA聚合酶為rTth?DNA聚合酶，?dNTP為dATP、dGTP、dCTP、dUTP的組合。

3.根據權利要求1所述的熒光PCR試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液與所述PCR啟動劑的體積比為（10~30）：（5~15）。

4.根據權利要求1所述的熒光PCR試劑盒，其特征在于，所述陰性質控品為不含沙眼衣原體、淋球菌及解脲脲原體的拭子涮洗液；

所述陽性質控品包括：含有沙眼衣原體目的片段的質粒、含有淋球菌目的片段的質粒及含有解脲脲原體目的片段的質粒。