[發(fā)明專利]一種同步糖化發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911033002.X
• 申請日: 2019-10-28
• 公開（公告）號: CN112725386B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發(fā)明（設計）人: 樊亞超;張霖;師文靜
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司大連石油化工研究院
• 主分類號: C12P7/56
• 分類號: C12P7/56;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種同步糖化發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸的方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）將木質纖維素原料進行預處理，固液分離得到殘渣Ⅰ和液體Ⅱ；所述的木質纖維素為秸稈、木屑和農(nóng)林廢棄物中至少一種；所述的預處理是加入質量濃度為1%-5%堿液，控制木質纖維素原料與堿液的固液質量比為1:5-1:10；（2）制備糞腸球菌DLY-LFYC種子液，保藏編號為CGMCC No.15821；（3）將糞腸球菌種子液、殘渣Ⅰ、纖維素酶以及不加糖的MRS培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐，在酶解條件下進行同步糖化發(fā)酵，酶解溫度為45-50℃，同時流加步驟（1）液體Ⅱ，直至發(fā)酵結束；糞腸球菌DLY-LFYC種子液的加入量為發(fā)酵液體積的5%-20%；殘渣Ⅰ一次性加入或者分批次流加，加入量根據(jù)發(fā)酵培養(yǎng)基中纖維素的濃度確定，最終使發(fā)酵培養(yǎng)液中纖維素的濃度為70g/L-170g/L；所述的纖維素酶主要包括內切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶，纖維素酶的加入量為2-10FPIU/g纖維素。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述的木質纖維素為玉米秸稈。

3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述的預處理是將木質纖維素原料機械粉碎到粒徑為0.1-50mm，然后加入堿液，在105-125℃處理5-30min。

4.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于：所述堿為NaOH、KOH、Ca(OH)₂、氨水中的至少一種。

5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）糞腸球菌發(fā)酵種子液的制備方法為：采用MRS培養(yǎng)基，將甘油保藏菌接種至試管進行培養(yǎng)，在45-50℃靜置培養(yǎng)12-24h，得到一級種子液；隨后接入搖瓶進行擴大培養(yǎng)，接種量為5%-20%，在45-50℃靜置培養(yǎng)8-12h，得到二級種子液。

6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）殘渣Ⅰ分批次流加。

7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）所述的酶解條件為pH4.5-6.5，攪拌轉速為200-400rpm，發(fā)酵時間為72-168h。

8.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）通過pH控制步驟（1）液體Ⅱ的流加，使pH為4.5-6.5。

9.根據(jù)權利要求1或8所述的方法，其特征在于：隨著發(fā)酵的進行，液體Ⅱ不滿足要求，流加堿液控制發(fā)酵，所述的堿液是NaOH溶液、KOH溶液、Ca(OH)₂溶液、氨水中的至少一種。