[發明專利]一種生物轉化制備長鏈二元酸的方法

有效

• 申請號: 201911032967.7
• 申請日: 2019-10-28
• 公開（公告）號: CN112725387B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 張霖;樊亞超;師文靜
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司大連石油化工研究院
• 主分類號: C12P7/6409
• 分類號: C12P7/6409;C12R1/74
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種生物轉化制備長鏈二元酸的方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）在發酵罐內加入發酵菌種子液和發酵培養基，一次性添加烷烴，啟動發酵過程；所述發酵菌為熱帶假絲酵母（Candida?tropicalis）突變株PF-UV-56，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.0356；所述的烷烴為C₁₁-C₁₆的正構烷烴；

（2）通過通氣量和罐內壓力的組合方式，調控發酵過程，發酵尾氣進入烷烴分離器，產生的液化烷烴返回發酵罐；通氣量和罐內壓力的組合方式具體為：在發酵0～24h內，通氣量為0.5～0.7vvm，罐內壓力控制為0.10～0.12MPa；24～96h內，通氣量為1.1～1.2vvm，罐內壓力控制為0.08～0.09MPa；96h～發酵結束，通氣量為0.8～1.0vvm，罐內壓力控制為0.1～0.11MPa；采用逐級調整pH的方式調控發酵過程，具體為：在發酵0～24h內，不進行pH控制；24h后將pH調整至6.8～7.0；隨后每間隔24h將pH控制值提高0.1～0.3，直至發酵結束；

（3）發酵結束后，經破乳、膜過濾、酸析、過濾、烘干后，獲得長鏈二元酸產品。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述的發酵菌種子液是將斜面保藏的菌種經搖瓶擴大培養及種子罐擴大培養，獲得發酵菌種子液；所述的搖瓶擴大培養，從搖瓶種子開始，進入下一級培養接種量按照7～15倍進行擴大培養；所述的種子罐擴大培養采用通入空氣的培養方式，通氣量為0.5～1.2vvm，發酵溫度為25～37℃；攪拌轉速為120～500rpm；培養時間為18～24小時。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：從搖瓶種子開始，進入下一級培養接種量按照10～12倍進行擴大培養；所述的種子罐擴大培養，發酵溫度為28～32℃，攪拌轉速為150～300rpm。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述的發酵菌種子液的添加量為發酵液體積的5%～20%。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述的發酵菌種子液的添加量為發酵液體積的10%～15%。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述的發酵培養基的配方為：蔗糖20～28g/L、玉米漿0.8～1.5g/L、酵母膏2.0～4.0g/L、氯化鈉0.8～1.2g/L、磷酸二氫鉀3.0～3.5g/L、硫酸鎂1.2～1.8g/L、尿素1.2～4.8g/L，硫酸銨1.5～2g/L、醋酸鈉1.5～1.8g/L。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）所述的烷烴的添加量為發酵液體積的20%～25%。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）所述發酵過程中發酵溫度為25～37℃，攪拌轉速為120～500rpm，發酵時間為138～144小時。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：步驟（2）所述發酵過程中發酵溫度為28～32℃，攪拌轉速為150～300rpm。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）所述發酵尾氣通過尾氣管道水平延伸進入烷烴分離器內部，進入烷烴分離器內部的管道底部設流通小孔，尾氣經流通小孔進行液化，液化烷烴流入烷烴分離器底部，經底部排放孔流出后通過泵返回發酵罐中。

11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于：流通小孔與管道連接處的橫截面積總和為尾氣管道橫截面積的80%，流通小孔出口總橫截面積為管道橫截面積的60%。

12.根據權利要求1、10或11所述的方法，其特征在于：烷烴分離器進行2～4級串聯連接，以提升尾氣中烷烴的回收效果。