[發(fā)明專利]一種浸潤(rùn)性T細(xì)胞的培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911029541.6
• 申請(qǐng)日: 2019-10-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110628717B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柴勛;李曉飛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海科醫(yī)聯(lián)創(chuàng)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/0783
• 分類號(hào): C12N5/0783
• 代理公司: 寧波鄞州全方專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 33242
• 代理人: 樓瑜舟

1.一種浸潤(rùn)性T細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于：包括以下步驟：1)利用腫瘤組織制備形成效應(yīng)T細(xì)胞，2)加入退分化培養(yǎng)基和經(jīng)輻照滅活的工程化細(xì)胞，使效應(yīng)T細(xì)胞退分化為T(mén)IL-TCM，所述經(jīng)輻照滅活的工程化細(xì)胞比例為1/100，3)使用擴(kuò)增培養(yǎng)基擴(kuò)增TCM；

所述退分化培養(yǎng)基為AIM-V，3-21mg/ml三羥甲基乙烷，0.4-2mg/ml的BaCL₂，30-80 μ g/ml依維莫司，1-7mg/ml KCl ；

所述擴(kuò)增培養(yǎng)基為AIM-V，9-32ng/ml的IL2，2-9％自體血清。

2.如權(quán)利要求1所述的浸潤(rùn)性T細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟1)中的效應(yīng)T細(xì)胞為使用激活培養(yǎng)基激活外周血中的淋巴細(xì)胞。

3.如權(quán)利要求2所述的浸潤(rùn)性T細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述激活培養(yǎng)基為1640和AIM-V 1:1混合的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，55-100ng/mlCD28，20-60μ g/ml PD1抗體，70-300ng/mlCD137L，10-40ng/mlIL2，2-20％自體血清。

4.如權(quán)利要求3所述的浸潤(rùn)性T細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述激活培養(yǎng)基為1640和AIM-V 1:1混合的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，80ng/mlCD28，40μ g/mlPD1抗體，200ng/ml CD137L，20ng/mlIL2，10％自體血清。

5.如權(quán)利要求1所述的浸潤(rùn)性T細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述退分化培養(yǎng)基為AIM-V，10mg/ml三羥甲基乙烷，1mg/ml的BaCl₂ ，50μ g/ml依維莫司，3mg/ml KCl 。

6.如權(quán)利要求1所述的浸潤(rùn)性T細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述擴(kuò)增培養(yǎng)基為AIM-V，20ng/ml的IL2，5％自體血清。