[發明專利]一種早期結直腸癌診斷標志物circ3823及其應用

有效

• 申請號: 201911028235.0
• 申請日: 2019-10-28
• 公開（公告）號: CN110592220B
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發明（設計）人: 孫振強;郭雅欣;汲翔;袁維堂;汲振余;陳晨;范丹丹;劉金波;趙陸洋;邵博
• 申請（專利權）人: 鄭州大學第一附屬醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113
• 代理公司: 鄭州浩德知識產權代理事務所(普通合伙) 41130
• 代理人: 王國旭

本發明一種早期結直腸癌診斷標志物，所述診斷標志物為環狀RNA?circ3823，核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示；環狀RNA?circ3823在制備早期結直腸癌診斷工具中的應用，所述工具為試劑盒，所述工具包括用來擴增特異性識別環狀RNA?circ3823的核酸序列的引物對；能夠明確清楚地表征早期結直腸腫瘤疾病的發生，該標志物在多個早期CRC組織樣本中的表達顯著高于在對照組織樣本（距離腫瘤組織5cm的正常組織）中的表達；且該標志物在多個早期CRC患者血清樣本中的表達顯著高于在對照的健康血清樣本中的表達。

技術領域

本發明涉及腫瘤標志物技術領域，尤其涉及一種早期結直腸癌診斷標志物circ3823及其應用。

背景技術

結直腸癌（CRC）是消化系統的高發腫瘤，其惡性程度高并嚴重影響患者的生存期。研究表明，CRC的早期診斷可以顯著提高患者的5年生存率，但早期特異性標志物的缺乏導致CRC的早期診斷和治療嚴重不足。因此，尋找早期CRC的診斷標志物是迫切和必要的。

環狀RNA（circRNA）是一種特殊類型的非編碼RNA，在疾病中起著重要的調節作用。作為腫瘤生物標志物，circRNA具有許多優點。CircRNA具有閉和環狀結構，不易被核酸外切酶降解，比線性RNA更穩定。此外，circRNA在真核細胞中廣泛存在，具有一定的組織特異性，時空特異性和疾病特異性，其中大多數是高度保守的。研究發現，circRNA與腫瘤TNM分型密切相關。此外，circRNA可以在外泌體和體液如外周血和尿液中檢測到。最近的一些研究證實，circRNA在早期腫瘤的診斷中具有良好的敏感性和特異性。這些都表明circRNA作為腫瘤的生物標志物具有諸多優勢。

因此，本研究基于高通量測序的結果，篩選出在早期CRC中特異性高表達的分子circ3823，通過在組織和血清樣本中驗證其表達量，發現circ3823有潛力作為早期CRC的標志物，并有希望應用于早期CRC的大規模人群篩查。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的是提供一種早期結直腸癌診斷標志物circ3823及其應用，本發明公開了一種新的外周血來源的circRNA?3823用于診斷早期結直腸癌的標志物，能夠明確清楚地表征早期結直腸腫瘤疾病的發生，該標志物在多個早期CRC組織樣本中的表達顯著高于在對照組織樣本（距離腫瘤組織5cm的正常組織）中的表達；且該標志物在多個早期CRC患者血清樣本中的表達顯著高于在對照的健康血清樣本中的表達。

本發明一種早期結直腸癌診斷標志物，所述診斷標志物為環狀RNA?circ3823，核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示。

環狀RNA?circ3823在制備早期結直腸癌診斷工具中的應用。

進一步的，所述工具為試劑盒。

進一步的，所述工具包括用來擴增特異性識別環狀RNA?circ3823的核酸序列的引物對。

進一步的，所述引物對包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ?ID?No.2所示；所述下游引物的核苷酸序列如SEQ?ID?No.3所示，circRNA引物的設計不同于普通線性RNA，是針對circRNA的back-spliced?junction位點設計特異性的引物（divergent?primers）。

所述的試劑盒的制備可采用本領域已知的生物試劑盒的常規制造方法，本發明中的circ3823可以是天然的或是人工合成的。

本發明至少具有以下優點：