[發明專利]龍血竭提取物的制備方法及用途

有效

• 申請號: 201911023708.8
• 申請日: 2019-10-25
• 公開（公告）號: CN110559382B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發明（設計）人: 李軍;胡仲冬;屠鵬飛;陳孝男;趙亞楠;楊愛琳;龐道然;田穎穎;唐雷夢媛;黃惠銘
• 申請（專利權）人: 北京中醫藥大學
• 主分類號: A61K36/896
• 分類號: A61K36/896;A61P35/00
• 代理公司: 北京悅成知識產權代理事務所(普通合伙) 11527
• 代理人: 高艷麗

本發明公開了一種龍血竭提取物的制備方法及用途。所述龍血竭提取物的制備方法為：將龍血竭藥材用石油醚除雜，所得藥渣用乙酸乙酯提取，所得提取液濃縮、干燥，得到所述龍血竭提取物。本發明的龍血竭提取物具有顯著的抗腫瘤作用，因而具有制備抗腫瘤藥物的用途。

技術領域

本發明涉及龍血竭提取物的制備方法，還涉及其用于制備抗腫瘤的藥物的用途。

背景技術

龍血竭為百合科劍葉龍血樹的樹脂，主要分布在我國云南及東南亞國家，具有活血散瘀、定痛止血、斂瘡生肌等功效，適用于跌打損傷、瘀血作痛、外傷出血等癥。

有研究發現龍血竭75％乙醇粗提物能抑Cholangiocarcinoma細胞增殖并誘導HCCC9810和QBC939細胞系凋亡且成時間和濃度依賴性。龍血竭75％乙醇粗提物明顯下調抗凋亡蛋白Survivin的表達及上調促凋亡蛋白Bak的表達，同時也抑制體內腫瘤生長。

CN1481788公開了一種龍血竭總黃酮制劑的制備工藝：龍血竭藥材粉碎成粗粉，加6-10倍量乙酸乙酯回流提取2-3次，每次1-2小時，濾過，合并2次濾液，回收乙酸乙酯并濃縮至干；乙酸乙酯提取物粉碎成粗粉，以20-40倍提取物量的0.2-0.5％NaOH溶液攪拌20-40分鐘使溶解，濾過；濾液用5-12％HCl調pH至1～2，靜置8-24小時，傾出上清液，棄去；沉淀離心濾過，收集沉淀物，用去離子水洗至pH試紙檢測為中性，60℃以下真空干燥，粉碎，即得龍血竭總黃酮。該方法制備方法復雜，除雜步驟繁瑣。

CN101024604A公開了一種從龍血竭中分離純化的二氫查耳酮化合物的制備方法，其特征在于具有以下的工藝過程和步驟：a.取一定量的龍血竭粉末為原料，用石油醚于索氏抽提器中在70℃抽提8～10小時；將殘留物中的石油醚揮干后，再用氯仿于索氏抽提器中在60℃抽提8～12小時，提取液經減壓旋轉蒸發儀濃縮，并在40℃干燥，得氯仿提取物；b.將上述氯仿提取物再用甲醇溶解，加入一定量的粒度為200～300目的硅膠，攪拌均勻；待甲醇揮發后，將其研碎，上硅膠柱或快速硅膠柱；用石油醚-乙酸乙酯進行梯度洗脫，即用石油醚-乙酸乙酯的體積比分別為9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8、1∶9的混合溶劑進行洗脫；取8∶2和/或7∶3和/或6∶4的洗脫部分用減壓旋轉蒸發儀濃縮，隨后在40℃下干燥，得石油醚-乙酸乙酯提取物；c.將上述提取物再用甲醇溶解后，用Sephadex LH-20凝膠柱層析，并以體積比為1∶1的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫；洗脫溶劑總量為8～10個柱體積；收集過柱后的8～10個餾分，根據硅膠板點樣分析結果，將第6～第8個餾分注入高效液相制備色譜儀純化，棄去雜質峰，收集主成分峰；d.將上述純化后所得餾分經旋轉蒸發儀濃縮，在40～50℃下干燥后，即得新二氫查耳酮化合物。該方法得到氯仿提取段，經過復雜的純化步驟，獲得新二氫查耳酮化合物。

到目前為止，尚未見報道該龍血竭藥材用石油醚除雜后的乙酸乙酯提取物具有抗腫瘤的用途。

發明內容

有鑒于此，本發明的一個目的在于提供一種龍血竭提取物的制備方法，該制備方法操作簡單，無需復雜的后續處理，獲得的龍血竭提取物的化學成分更少而抗腫瘤效果顯著。

本發明的另一目的在于提供上述龍血竭提取物用于制備抗腫瘤藥物的用途。

本發明采用如下技術方案實現上述目的。

一方面，本發明提供一種具有抗腫瘤作用的龍血竭提取物的制備方法，包括如下步驟：將龍血竭藥材用石油醚除雜，所得藥渣用乙酸乙酯提取，所得提取液濃縮、干燥，得到所述龍血竭提取物。

根據本發明的制備方法，優選地，所述制備方法包括如下步驟：

(1)將龍血竭藥材用石油醚提取1～5次，固液分離，得到藥渣；

(2)將所述藥渣用乙酸乙酯提取1～5次，固液分離，合并乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯溶劑，得到所述龍血竭提取物。