[發(fā)明專利]一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法

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• 申請日: 2019-10-23
• 公開（公告）號: CN110715988A
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發(fā)明（設計）人: 曾軍杰;陳頁;盧義博
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省海洋水產(chǎn)研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/08;G01N30/72
• 代理公司: 33297 杭州仁杰專利代理事務所(特殊普通合伙)
• 代理人: 胡寅旭

1.一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）樣品預處理：將水產(chǎn)品組織樣品置于薄膜袋中密封后進行微凍，將微凍的樣品進行間歇研磨勻質(zhì)，得到勻質(zhì)樣品；

（2）提取：在勻質(zhì)樣品中加入乙腈進行超聲提取后，離心取上清液；離心固體物用乙腈重復以上操作提取一次，合并兩次提取的上清液，加入乙腈定容，得提取液；

（3）凈化：取適量提取液置于預先加有N-丙基乙二胺（PSA）的離心管中，渦旋后離心，取上清液；

（4）濃縮轉(zhuǎn)溶：取適量上清液氮氣吹干，用流動相A與流動相B的混合液溶解，微孔過濾后，UPLC-MS/MS上機檢測分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法，其特征在于，步驟（1）中，間歇研磨為研磨2~3s，停止1s。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法，其特征在于，步驟（2）中，步驟（2）中，取1g勻質(zhì)樣品并加入10~12mL乙腈，超聲提取10~15min；5000~6000r/min離心5~8min；加入乙腈定容至25mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法，其特征在于，步驟（3）中，取10 mL提取液加入預先加有30~50mgN-丙基乙二胺的離心管中；渦旋2~5min；5000~6000r/min離心5~8min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法，其特征在于，步驟（4）中，取5mL上清液于40℃氮氣吹干；流動相A為0.05%甲酸-5mM乙酸銨-水溶液，流動相B為乙腈，混合液中，流動相A：流動相B（V:V）=8.5：1.5；經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾。

6. 根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法，其特征在于，步驟（4）中，色譜條件：Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；柱溫30℃；進樣量5μL；流動相：A=0.05%甲酸-5mM乙酸銨-水溶液，B=乙腈；流速0.25mL/min；梯度洗脫：0～0.5 min，15% B；0.5～1.5 min，15%～65% B；1.5～4.0 min，65% B；4.0～4.5 min，65%～15% B；4.5～5.0 min，15% B。

7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種水產(chǎn)品中泰妙菌素和沃尼妙林的檢測方法，其特征在于，步驟（4）中，質(zhì)譜條件：電噴霧離子源（ESI）；掃描方式：多反應監(jiān)測（MRM），正離子模式；毛細管電壓：3.0KV；離子源溫度120℃；脫溶劑氣溫度：350℃；干燥氣體流速800L/h；碰撞池壓力：3.0×10^－3 mbar。