[發明專利]一種浙江紅山茶花藥離體培養獲得再生植株的方法

有效

• 申請號: 201910989543.3
• 申請日: 2019-10-17
• 公開（公告）號: CN110604060B
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發明（設計）人: 葉思誠;姚小華;卓仁英;王開良;馬康榮
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院亞熱帶林業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;A01G24/15;A01G24/28
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 盛大文

本申請屬于植物細胞工程領域，具體涉及一種紅山茶花藥離體培養獲得再生植株的方法。所述紅山茶花藥離體培養獲得再生植株的方法，包括：將紅山茶的花藥進行低溫預處理，愈傷組織誘導培養，分化培養和生根培養；其中，所述愈傷組織誘導培養采用暗培養；所采用的愈傷組織誘導培養基包括：激素組合，防褐變劑以及30?80g/L的蔗糖，所述激素組合為2,4?D、KT和TDZ組合，或2,4?D、6?BA和TDZ組合。所述方法能夠顯著提高紅山茶花藥再生培養的愈傷誘導率、分化率和生根率。

技術領域

本申請屬于植物細胞工程領域，具體涉及一種紅山茶花藥離體培養獲得再生植株的方法。

背景技術

紅山茶主要來自山茶科(Theaceae)山茶屬(Camellia)紅山茶組 (SectCamellia)的物種及其品種，花紅色，艷麗，具有極高的觀賞價值，同時一些物種結實率和種仁含油率較高，還可以作為優質的木本食用油料。

浙江紅山茶(Camellia chekiangoleosa Hu)，又稱為浙江紅花油茶，是我國山茶屬(Camellia spp.)的特有種，是一種優良的紅山茶種。浙江紅山茶耐寒，開花于早春，花朵碩大鮮艷且密集，果實酷似蘋果，顏色鮮紅或黃綠色，成熟時滿樹紅果，具有極高的觀賞價值。浙江紅山茶具有很高的油用價值。浙江紅山茶的種仁含油率高達60％左右，茶油中油酸的含量高達85％左右，其種仁含油率和油酸含量均顯著高于普通油茶、攸縣油茶、小果油茶、越南油茶等白花油茶物種。茶油是我國特有的木本食用油料，其富含油酸、亞油酸等不飽和脂肪酸，有“東方橄欖油”之美譽，含有維生E、角鯊烯、甾醇等微量成分，是一種具有多種保健作用的功能性食用油。浙江紅山茶集觀賞、油用、藥用于一身，具有重要的經濟價值，在油茶和花卉生產中有著巨大的潛在價值。

日本紅山茶(Camellia Japanica)為山茶屬(Camellia spp.)紅山茶組(SectionCamellia)植物，主要分布在日本的伊豆諸島、九洲、五島、本洲、四國及最南面的沖強縣。日本紅山茶一般高4～5m，11 月至次年1-2月開花，花色艷麗，樹型美觀，可作園林觀賞樹種和盆景生長。日本紅山茶產量較高，盛果期茶油產量可達450kg/hm²。研究表明，日本紅山茶的油酸含量高達84％,與浙江紅山茶的茶油相似，可以作為優質的木本食用油料，經加工后可達到化妝品用茶油標準，使用后對人體皮膚十分有益。山茶花名貴品種‘玉之浦’ (Tama-no-ura,日文名)是日本人在野生的日本紅山茶(Camellia Japanica)林中發現的一個變異植株?！裰帧趪H茶花界名聲很大,是國內外茶花苗圃和愛好者心目中的名種。從1993年起,陸續從‘玉之浦’實生苗中選育出了10多個新品種。由于紅山茶為多年生木本植物，基因高度雜合，具有豐富的遺傳多樣性，傳統雜交育種方式周期長，其再生培養的誘導率、分化率和生根率相對較低，再生效率低，難以獲得純合植株。

發明內容

本發明的目的在于提供一種紅山茶花藥離體培養獲得再生植株的方法，為紅山茶育種提供單倍體育種材料，也為紅山茶轉基因育種提供了理想的受體材料；所述方法能夠顯著提高紅山茶花藥再生培養的愈傷誘導率、分化率和生根率。

本發明所述一種紅山茶花藥離體培養獲得再生植株的方法，包括：將紅山茶的花藥進行低溫預處理，愈傷組織誘導培養，分化培養和生根培養；所述愈傷組織誘導培養所采用的愈傷組織誘導培養基包括：激素組合，防褐變劑以及30-80g/L的蔗糖，所述激素組合為2,4-D、 KT和TDZ組合，或2,4-D、6-BA和TDZ組合。

本發明提供的方法，以紅山茶的花藥為材料，通過低溫預處理、花藥愈傷組織的誘導、愈傷組織增殖和分化、幼苗生根，最終獲得紅山茶完整植株，建立了一套適合紅山茶的花藥離體再生體系。