[發明專利]一種用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒

在審

• 申請號: 201910988688.1
• 申請日: 2019-10-17
• 公開（公告）號: CN110714096A
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發明（設計）人: 張仁利;郭永超;陳瑩瑩;陽帆;黃亞蘭;黃達娜
• 申請（專利權）人: 深圳市疾病預防控制中心
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 44414 深圳中一聯合知識產權代理有限公司
• 代理人: 黃志云

1.一種用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如下試劑：RT-PCR反應液，RT-PCR酶，陽性質控品，陰性質控品；

其中，所述RT-PCR反應液包含一步反應RT-qPCR緩沖液，以及登革病毒I型上游特異性引物、登革病毒I型下游特異性引物、登革病毒I型封堵引物、登革病毒I型探針；登革病毒II型上游特異性引物、登革病毒II型下游特異性引物、登革病毒II型封堵引物、登革病毒II型探針；登革病毒III型上游特異性引物、登革病毒III型下游特異性引物、登革病毒III型封堵引物和登革病毒III型探針；登革病毒IV型上游特異性引物、登革病毒IV型下游特異性引物、登革病毒IV型封堵引物和登革病毒IV型探針。

2.根據權利要求1所述的用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒，其特征在于，

所述登革病毒I型上游特異性引物的序列為Seq.ID No.1，為CGAAAGCCACGGHTTGAGC；

所述登革病毒I型下游特異性引物的序列為Seq.ID No.2，為CCCATGCGTACAGCTTCCAT；

所述登革病毒I型封堵引物的序列為Seq.ID No.3，為AGCATGATYCACTGCAGCACGG-P；

所述登革病毒I型探針的序列為Seq.ID No.4，為HEX-CCGTGCTGCCTGTRGCTCCATC-BHQ1。

3.根據權利要求1所述的用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒，其特征在于，

所述登革病毒II型上游特異性引物的序列為Seq.ID No.5，為TGGTGACACAGATGGCWATGA；

所述登革病毒II型下游特異性引物的序列為Seq.ID No.6，為GRGTTCTCGTGTCYACTTTYTC；

所述登革病毒II型封堵引物的序列為Seq.ID No.7，為TAYCACCACTTCCCGTGRGTCGTGTCT-P；

所述登革病毒II型探針的序列為Seq.ID No.8，為FAM-AGACACGACYCCATTTGGACAACARCG-BHQ1。

4.根據權利要求1所述的用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒，其特征在于，

所述登革病毒III型上游特異性引物的序列為Seq.ID No.9，為CMAAAGCCACGGTTTGAGC；

所述登革病毒III型下游特異性引物的序列為Seq.ID No.10，為CGTGCGTACAGCTTCCACR；

所述登革病毒III型封堵引物的序列為Seq.ID No.11，為YTCATTCTAGCACGGCAGCACGG-P；

所述登革病毒III型探針的序列為Seq.ID No.12，為ROX-CCGTGCTGCCTGTAGCTCCGTCR-BHQ2。

5.根據權利要求1所述的用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒，其特征在于，

所述登革病毒IV型上游特異性引物的序列為Seq.ID No.13，為ACTTGTGCCACGGYTTGAGC；

所述登革病毒IV型下游特異性引物的序列為Seq.ID No.14，為AACCGCTAGTCCAATATGCCAC；

所述登革病毒IV型封堵引物的序列為Seq.ID No.15，為TTATTCTAGCCACTGCAGCACGG-P；

所述登革病毒IV型探針的序列為Seq.ID No.16，為CY5-CCGTGCTGCCTGTAGCTCCGCC-BHQ2。

6.根據權利要求1所述的用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒，其特征在于，所述RT-PCR酶包括RNA酶抑制劑、熱啟動Taq DNA聚合酶和逆轉錄酶。

7.根據權利要求1所述的用于同時檢測4種登革熱病毒分型的試劑盒，其特征在于，所述陽性質控品為含有登革病毒I型、II型、III型和IV型目的基因片段的合成質粒混合物；和/或，

所述陰性質控品為DEPC水。