[發明專利]蛋白質分離方法

在審

• 申請號: 201910987025.8
• 申請日: 2019-10-17
• 公開（公告）號: CN112390850A
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 鄭石治;扶亞民;賴世明
• 申請（專利權）人: 華懋科技股份有限公司;上海華懋環保節能設備有限公司
• 主分類號: C07K1/18
• 分類號: C07K1/18;C07K1/14
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 吳夢圓

一種蛋白質分離方法，其包含以下步驟：提供至少一管式膜且其本身含有吸附劑；提供包含待分離物質的蛋白粗萃液；將蛋白粗萃液輸入管式膜內的通道且沿管式膜的縱向通過管式膜，蛋白粗萃液內所含待分離物質被吸附劑吸附而成為殘留液；檢測殘留液內所含待分離物質的濃度，直到殘留液內所含待分離物質的濃度大于蛋白粗萃液內所含待分離物質的濃度的一預定比例，則停止輸入蛋白粗萃液至通道；提供一脫附緩沖液輸入通道且沿管式膜的縱向通過管式膜，借此，被吸附在吸附劑中的待分離物質溶入脫附緩沖液中而被分離。

技術領域

本發明涉及蛋白質分離，尤其涉及一種用于自蛋白液中分離特定蛋白質的蛋白質分離方法。

背景技術

現有技術中，蛋白質可以通過穿透過濾的方式由蛋白液中分離。一般而言，蛋白液被加壓穿透含有吸附劑的濾膜，蛋白液穿透濾膜的過程中，其內所含特定蛋白質被吸附劑吸附。再將吸附有蛋白質的濾膜置入脫附緩沖液，將蛋白質溶出至脫附緩沖液中而分離。

為了便于加壓，濾膜制作為一端開口且另一端封閉的管狀管式膜，加壓蛋白液通入管式膜后由管式膜的側面穿透流出。其缺點在于高壓管路設置不易且成本較高，濾出殘流液電需要較大的容器回收，因此設備規模受限。其次，由于薄膜厚度僅約0.4mm至0.6mm，蛋白液穿透管式膜的時間短，吸附劑與蛋白液接觸時間不足，吸附效率不佳。

有鑒于此，本發明人針對上述現有技術，潛心研究并配合科學原理的運用，盡力解決上述的問題點，即成為本發明改良的目標。

發明內容

本發明提供一種用于自蛋白液中分離特定蛋白質的蛋白質分離方法。

本發明提供一種蛋白質分離方法，其包含以下步驟：提供至少一管式膜，管式膜的結構本身含有吸附劑，管式膜內具有縱向貫穿管式膜的至少一通道；提供包含一待分離物質的一蛋白粗萃液；將蛋白粗萃液輸入通道，且沿管式膜的縱向通過管式膜，且蛋白粗萃液內所含待分離物質被吸附劑吸附而成為一殘留液；重復檢測殘留液內所含待分離物質的濃度，直到殘留液內所含待分離物質的濃度大于蛋白粗萃液內所含待分離物質的濃度的一預定比例，例如：1至5％，則停止輸入蛋白粗萃液至通道；及提供一脫附緩沖液輸入通道，且沿管式膜的縱向通過管式膜，而被吸附在吸附劑中的待分離物質溶入脫附緩沖液中而成為一脫附液。

本發明的蛋白質分離方法，其吸附劑為陽離子交換樹脂且蛋白粗萃液的pH值小于待分離物質的等電點。待分離物質為溶菌酶。脫附緩沖液包含摩爾濃度45mM至55mM的三羥甲基氨基甲烷(Tris)以及摩爾濃度0.5M至1.5M的氯化鈉。脫附緩沖液的pH值為7.5至8.5。脫附緩沖液通過管式膜的流向與蛋白粗萃液通過管式膜的流向相反。

本發明的蛋白質分離方法，其還包含一步驟：提供一清洗緩沖液輸入通道且沿管式膜的縱向通過管式膜而去除殘留在管式膜內的蛋白粗萃液，清洗緩沖液包含摩爾濃度45mM至55mM的三羥甲基氨基甲烷(Tris)以及摩爾濃度0.05M至0.15M的氯化鈉。清洗緩沖液的pH值為7.5至8.5。清洗緩沖液通過管式膜的流向與蛋白粗萃液通過管式膜的流向相反。

本發明的蛋白質分離方法，其還包含一步驟：干燥脫附液而得到固態的待分離物質。

本發明的蛋白質分離方法，其管式膜為多個且這些管式膜相互平行并排且配置成束，組成吸附模塊。管式膜內形成縱向貫穿管式膜的多個通道。

本發明的蛋白質分離方法通過吸附方式分離待分離物質，其不需要通過高壓驅使蛋白粗萃液穿透管式膜，管路壓損低，因此可以通過設置成本較低且較易于設置的低壓管路設備實施。其次，本發明的蛋白質分離方法其各種作業的液體則由管式膜的一端單點輸入，并由管式膜的另一端單點回收。因此本發明的管式膜可以在輸入輸出點之間任意并排或串接，故易于擴張處理量與吸附容量。

附圖說明

圖1為本發明較佳實施例的蛋白質分離方法的步驟流程圖；