[發明專利]一種梅魚加工副產品的抗真菌肽的制備方法

有效

• 申請號: 201910974905.1
• 申請日: 2019-10-14
• 公開（公告）號: CN110724721B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發明（設計）人: 陳美齡;胡嘉惠
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C07K1/34
• 分類號: C07K1/34
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

本發明涉及生物技術提取領域，針對現有技術的抗真菌肽抗菌活性較低及抑菌種類有限的問題，公開了一種梅魚加工副產品的抗真菌肽制備方法，包括以下步驟：（1）、預處理；（2）、酶解；（3）、過濾得澄清液；（4）、分離純化；（5）、多肽分級；（6）、培養觀察抑菌圈。本發明提供了一種梅魚加工副產品的抗真菌肽制備方法，該抗真菌肽具有較高的抗菌活性，且是初次從梅魚中提取抗真菌肽；該抗真菌肽是從梅魚的加工副產品魚頭中進行提取，實現廢物再利用，成本較低；豐富了抗真菌肽的種類，能更好的對食品進行保質保鮮，助于了解利用梅魚副產物蛋白質水解后的抗真菌肽保存食物、防止腐敗和病原微生物。

技術領域

本發明涉及生物技術提取領域，尤其是涉及一種梅魚加工副產品的抗真菌肽的制備方法。

背景技術

食品安全是公共衛生領域的一個重要問題，隨著我國居民生活水平的不斷提高，人們對食品質量和安全的關注程度越來越高，而由微生物引起的食品腐敗和食物中毒是食品安全的首要問題，尤其是含糖和淀粉高的食品容易受真菌污染，且在一定的條件下可產生有毒代謝產物—真菌毒素。

抗菌肽是小分子化合物，通常有10-50個氨基酸，抗菌肽來源非常廣泛，昆蟲、哺乳類、兩棲類、細菌和真菌及植物體內都有發現；海洋動物生活于富含各種各樣微生物的水環境中長期的生存適應使其形成了有效防御功能，抗菌肽已被認為魚、蝦、貝等防御系統的主要成分之一；這些肽可以通過酶促水解或者化學水解在體外產生，在食品工業中抗菌肽發揮著積極的作用，它可以抑制病原細菌和真菌在食品中的生長，抗真菌肽是抗菌肽中的一個子部分。

梅魚是一種小型海洋魚類，有重要的經濟價值，這種魚常被用來制作罐頭制品，在加工過程中會產生大量的抗真菌肽。

專利號CN200910175405.8，專利名稱為“一種抗真菌肽及其制備方法和應用”，本發明提供了一種抗真菌肽，是從苦蕎種子水溶性提取物中純化得到的，分子量為3.909kDa的多肽。該抗真菌肽的制備方法是取苦蕎種子粉碎，脫脂，使用緩沖液抽提，經抽提獲得粗蛋白后，經過熱處理，蛋白質層析分離即Resource S陽離子交換和Superdex peptide凝膠排阻層析純化而獲得。該抗真菌肽對白腐菌，綠色木霉和鏈格孢霉的生長有顯著的抑制作用。

其不足之處在于，上述抗真菌肽為植物提取物，其抗菌活性較低，且只對特定菌種有一定的抑制作用。

發明內容

本發明是為了克服現有技術的抗真菌肽抗菌活性較低及抑菌種類有限的問題，提供一種梅魚加工副產品的抗真菌肽的制備方法，該抗真菌肽具有較高的抗菌活性，且該抗真菌肽是從梅魚的加工副產品魚頭中進行提取，實現廢物再利用，且是初次從梅魚中提取，豐富了抗真菌肽的種類，能更好的對食品進行保質保鮮。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種梅魚加工副產品的抗真菌肽的制備方法，包括以下制備步驟：

（1）、預處理：將梅魚魚頭進行清洗后絞碎，在料液比為1:6-9 (m/v)，溫度為48-52℃的條件下，用94-96%的甲醇水浴脫脂2-2.2h；脫脂后將上清液倒掉，用純水將沉淀洗凈，將脫脂魚頭肉在0-4℃、11900-12000 r/min條件下離心20-25min，收集沉淀；

（2）、酶解：將魚頭肉加到含有中性蛋白酶的酶解液中進行酶解；其中，中性蛋白酶的濃度為0.05-0.25wt%，酶解液質量為魚頭肉質量的2-4倍，酶解溫度為30-45℃，酶解液pH至控制在5-6，酶解時間為5-5.4h；

（3）、過濾得澄清液：向酶解液中添加質量為酶解液1-2wt%的改性果殼活性炭，并將酶解液加熱并脫色；將脫色后的酶解液轉移至板框過濾池內進行過濾，取澄清液；

所述改性果殼活性炭的制備步驟為：