[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)亞精胺的工程菌

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910972340.3
• 申請日: 2019-10-14
• 公開（公告）號: CN112725251B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蔡宇杰;梁鑫鑫;惠紅杰;鄧華祥;丁彥蕊;白亞軍;鄭曉暉
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P13/00;C12N15/70;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

1.一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，敲除了大腸桿菌基因組中編碼DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄抑制因子的metJ基因、編碼DNA結(jié)合雙轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的argR基因，并對編碼高絲氨酸O-琥珀酰轉(zhuǎn)移酶的metA基因進(jìn)行突變構(gòu)建負(fù)反饋突變體，以解除甲硫氨酸對高絲氨酸O-琥珀酰轉(zhuǎn)移酶的反饋抑制；

還敲除了將亞精胺轉(zhuǎn)移到胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PotABCD，并利用強(qiáng)啟動子替代編碼將亞精胺轉(zhuǎn)移到胞外的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白MdtJI蛋白的基因的天然啟動子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，利用強(qiáng)啟動子替代編碼甲硫氨酸腺苷基轉(zhuǎn)移酶的基因metK、編碼鳥氨酸脫羧酶的基因speC、編碼S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶和亞精胺合成酶的基因speDE的天然啟動子。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，所述強(qiáng)啟動子是trc啟動子。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，進(jìn)一步敲除了編碼二氨基庚酸脫羧酶的lysA基因。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，還敲除編碼高絲氨酸激酶和蘇氨酸合成酶的thrB和thrC基因。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，還敲除proC。

7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，進(jìn)一步敲除了編碼谷氨酸-腐胺連接酶的puuA基因。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，進(jìn)一步敲除了編碼谷氨酸-腐胺連接酶的puuA基因。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，進(jìn)一步敲除了編碼谷氨酸-腐胺連接酶的puuA基因。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，進(jìn)一步敲除了編碼谷氨酸-腐胺連接酶的puuA基因。

11.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，引入外源的合成亞精胺的途徑。

12.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，引入外源的合成亞精胺的途徑。

13.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，引入外源的合成亞精胺的途徑。

14.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，引入外源的合成亞精胺的途徑。

15.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，引入外源的合成亞精胺的途徑。

16.根據(jù)權(quán)利要求8-10任一項所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，引入外源的合成亞精胺的途徑。

17.根據(jù)權(quán)利要求11所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，所述的引入外源的合成亞精胺的途徑，是表達(dá)了外源羧基亞精胺脫氫酶基因、外源羧基亞精胺脫羧酶基因。

18.根據(jù)權(quán)利要求12-15任一項所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，所述的引入外源的合成亞精胺的途徑，是表達(dá)了外源羧基亞精胺脫氫酶基因、外源羧基亞精胺脫羧酶基因。

19.根據(jù)權(quán)利要求16所述的一種大腸桿菌基因工程菌，其特征在于，所述的引入外源的合成亞精胺的途徑，是表達(dá)了外源羧基亞精胺脫氫酶基因、外源羧基亞精胺脫羧酶基因。