[發明專利]具有生物活性的紫花苜蓿莖葉多糖及其硒化改性多糖的制備

有效

• 申請號: 201910971423.0
• 申請日: 2019-10-14
• 公開（公告）號: CN110790846B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 劉學貴;徐雙雙;高品一;李丹琦;張立新
• 申請（專利權）人: 沈陽化工大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A23L33/125;A23L33/16;A61P25/00
• 代理公司: 沈陽技聯專利代理有限公司 21205
• 代理人: 張志剛

具有生物活性的紫花苜蓿莖葉多糖及其硒化改性多糖的制備，涉及一種天然藥物改性多糖的制備，首先從干燥的紫花苜蓿干草中得到水提浸膏，去蛋白，去色素后，經過陰離子交換柱層析分離，用去離子水和一系列梯度的NaCl溶液洗脫，收集得到3個新的紫花苜蓿多糖組分APS1﹑APS2和APS3，它們的分子量范圍為8～20 KDa。對其中量大的APS2和APS3進行硒化修飾后得到新的硒化多糖Se?APS2和Se?APS3，它們的分子量范圍為6～12 KDa。其中Se?APS3的抗氧化活性最強。與APS2，APS3相比，硒化后得到的硒多糖具有明顯的神經細胞保護活性。以上研究內容為多糖及其硒化產物的活性分析和抗衰老功能食品及阿爾茨海默等疾病的藥品開發奠定了理論基礎。

技術領域

本發明涉及一種天然藥物改性多糖的制備，特別是涉及一種具有生物活性的紫花苜蓿莖葉多糖及其硒化改性多糖的制備。

背景技術

紫花苜蓿（Medicago sativa L.）是豆科苜蓿屬，一種多年生的牧草，品質較好，牧草的質量優良，適應性強，無草本氣味，可以在各種土壤和地形上生長，原產于伊朗、小亞細亞、外高加索等一帶，現在全世界范圍內都有非常廣泛和豐富的栽培,有著“牧草之王”的稱號。在民間，紫花苜蓿全草及根用于治療菌痢、腸炎、肺熱咳嗽、消化不良、黃疸、尿路結石等癥狀的疾病。

苜蓿多糖是一種從苜蓿的莖和葉中提取得到的天然多糖，已經被證明具有免疫調節、抗氧化、抗腫瘤、保肝臟、抗炎的作用，還能提高生產畜產品的能力，而且對機體的不良反應非常小。因此，深度開發紫花苜蓿中多糖資源，并深入研究其藥理活性和結構，對于紫花苜蓿的深加工及其在食品、工業、醫藥等領域的廣泛應用，具有重大的經濟和社會效益。

研究表明，對植物多糖進行硒化修飾后，會提高其生物活性或者增加新的活性，本研究采用硝酸-亞硒酸鈉法對分離得到的苜蓿多糖進行硒化修飾，并對多糖硒化前后的抗氧化活性進行研究，結果表明紫花苜蓿莖葉多糖及其硒化改性多糖均有抗氧化活性，進一步對其神經細胞保護活性進行研究，結果表明硒化后的多糖具有一定的神經細胞保護活性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種具有生物活性的紫花苜蓿莖葉多糖及其硒化改性多糖的制備，本發明制備的多糖化和硒化多糖具有一定的抗氧化活性，而且硒多糖在天然多糖的基礎上增加了神經細胞保護活性。為多糖的結構修飾，多糖的活性分析以及多糖抗衰老功能食品，神經細胞保護疾病有關的藥物的開發奠定了理論基礎。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

具有生物活性的紫花苜蓿莖葉多糖及其硒化改性多糖的制備，其制備過程包括取干燥的紫花苜蓿莖葉，依次用石油醚，乙醇回流提取去除脂和小分子后，加入蒸餾水加熱回流2～6次，過濾，合并濾液，去蛋白，去色素后得到紫花苜蓿粗多糖；將得到的粗多糖經過陰離子交換柱層析分離，依次用蒸餾水﹑0.1～0.5 mol/L的NaCl溶液進行洗脫，用凝膠純化后得到3個新的紫花苜蓿多糖APS1﹑APS2﹑APS3；

將上述得到的兩個產量較大的多糖APS2和APS3用硝酸-亞硒酸鈉(NA-SS)法進行硒化修飾得到2個新的硒多糖Se-APS2和Se-APS3。

所述的具有生物活性的紫花苜蓿莖葉多糖及其硒化改性多糖的制備，所述3個新的紫花苜蓿多糖，其結構片段分別為：APS1：2-O-acetyl-β-D-Manp-(1→3)-α-L-Araf-1(1→4)- α-L-Rhap-(1→，→3)- α-L-Rhap-(1→4)- α-L-Rhap-(1→；APS2：→3)-α-L-Rhap-(1→4)-α-L-Rhap-(1→，→3)-α-D-Galp-(1→4)-α-D-Galp-(1→，β-D-Manp-(1→2)-O-acetyl-β-D-Manp-(1→，β-D-Manp-(1→3)-α-L-Rhap-(1→；APS3：→3)-β-D-Fruf-(1→2)-α-D-Galp-(1→，α-D-Galp-(1→2)- α-L-Rhap-(1→，→3)-α-L-Araf-(1→3)- α-L-Rhap-(1→。