[發明專利]一種促皮膚愈合肽OA-GP11及其制備方法與應用有效
| 申請號: | 201910966166.1 | 申請日: | 2019-10-12 |
| 公開(公告)號: | CN110606869B | 公開(公告)日: | 2022-06-07 |
| 發明(設計)人: | 楊新旺;王瀅;楊瑩;劉乃心;唐璟;楊美鳳;傅陽;孫慧玲;李依林 | 申請(專利權)人: | 廣州市乾相生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K7/06 | 分類號: | C07K7/06;C07K1/20;A61K38/08;A61P17/02;A61K8/64;A61Q19/00;A23L33/18 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 皮膚 愈合 oa gp11 及其 制備 方法 應用 | ||
本發明公開了一種促皮膚愈合肽OA?GP11及其制備方法與應用。所述的促皮膚愈合肽OA?GP11的氨基酸序列為GPLSGINAECM。本發明純化得到的促皮膚愈合肽OA?GP11在體外抗氧化活性檢測、創傷修復細胞以及動物模型實驗中顯示了較強的活性,揭示本發明促皮膚愈合肽OA?GP11有潛在的應用前景。本發明的有益效果在于:促皮膚愈合肽OA?GP11具有結構簡單、促創傷修復活性強的有益特點。
技術領域
本發明屬于生物醫藥技術領域,具體涉及一種促皮膚愈合肽OA-GP11及其制備方法與應用。
背景技術
作為人體最大的器官,皮膚可以調節體溫并感知周圍環境。它能保護體內組織和器官免受物理和化學傷害,以及來自致病微生物的侵害。皮膚的傷口修復過程是復雜和費時的,且任何修復過程的干擾都可能加重病情,并延遲傷口愈合。難治性的傷口也會導致病原體的入侵,導致繼發感染、水和電解質紊亂、傳染性休克、器官衰竭甚至死亡。為了改善康復過程,并減少在傷口愈合過程中出現的并發癥,有效且快速地促進傷口愈合是至關重要的。目前,已知的幾種創傷修復藥物都存在一定的缺陷,包括穩定性差、活性低、存儲成本高、疤痕增生等。因此,功能多樣、活性高、穩定性高、特性專一的生物活性肽具有很高的探索價值。
兩棲動物作為一種皮膚裸露且棲息地復雜的物種,很容易受到外部傷害,因而,它們形成了一種保護性的皮膚防御系統。之前關于兩棲動物分泌物的研究已經確定了多種功能多樣的生物活性肽,包括抗菌肽、抗氧化肽、傷口愈合肽、細胞因子、神經調節肽和神經毒素等。值得注意的是,兩棲動物的皮膚在受損后可以迅速愈合,而且很少留疤,這表明了兩棲動物皮膚分泌物中存在某種可以縮短傷口愈合的過程物質。
我們從云南臭蛙的皮膚分泌物中分離出一種新型肽,OA-GL17,它具有較高的抗氧化活性,可以有效促進體內外傷口的愈合,且具有較高的穩定性及促創傷修復活性。
發明內容
本發明的第一目的在于提供一種促皮膚愈合肽OA-GP11;第二目的在于提供所述的促皮膚愈合肽OA-GP11的制備方法;第三目的在于提供所述的促皮膚愈合肽OA-GP11的應用。
本發明的第一目的是這樣實現的,所述的促皮膚愈合肽OA-GP11的氨基酸序列為GPLSGINAECM。
本發明的第二目的是這樣實現的,包括以下步驟:
A、用電刺激法取云南臭蛙皮膚分泌物,溶解于PBS,真空冷凍干燥后得到物料a于-80℃保存備用;
B、將物料a溶解于水中得到物料b,物料b用Tris-HCl緩沖液進行洗脫,收集洗脫液得到物料c;
C、將物料c進行第一次高效液相色譜反相層析得到物料d;
D、將物料d進行第二次高效液相色譜反相層析得到目標物促皮膚愈合肽OA-GP11。
本發明的第三目的是這樣實現的,所述的促皮膚愈合肽OA-GP11在制備促皮膚創傷修復的保健食品、化妝品或藥品中的應用。
本發明是從云南臭蛙的皮膚分泌物中分離出一種新型肽,OA-GL17,它具有較高的抗氧化活性,可以有效促進體內外傷口的愈合,且具有較高的穩定性及促創傷修復活性。所述的OA-GL17具有結構簡單、促創傷修復活性特點,可通過云南臭蛙皮膚分泌分離純化得到的有益特點。本發明提供的促皮膚愈合肽OA-GP11,其制備方法可以通過生物化學分離純化方法,由云南臭蛙皮膚分泌物中得到。上述方法制備的促皮膚愈合肽OA-GP11,可通過質譜及促創傷修復活性進行鑒定,促皮膚愈合肽OA-GP11的制備也可通過本領域常規的方法,采用化學合成或基因表達的方式得到。本發明純化得到的促皮膚愈合肽OA-GP11在體外抗氧化活性檢測、創傷修復細胞以及動物模型實驗中顯示了較強的活性,揭示本發明促皮膚愈合肽OA-GP11有潛在的應用前景。本發明的有益效果在于:促皮膚愈合肽OA-GP11具有結構簡單、促創傷修復活性強的有益特點。
附圖說明
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