[發(fā)明專利]利用PCR反應(yīng)系統(tǒng)進(jìn)行PCR反應(yīng)的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910954116.1
• 申請(qǐng)日: 2019-10-09
• 公開（公告）號(hào): CN112175787B
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡軍榮;韓巧玲;徐強(qiáng);崔相民
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 申翌生物科技（杭州）有限公司
• 主分類號(hào): C12M1/00
• 分類號(hào): C12M1/00;C12M1/36
• 代理公司: 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 劉娜

本發(fā)明提出了利用PCR反應(yīng)系統(tǒng)進(jìn)行PCR反應(yīng)的方法，該方法包括：將所述活塞進(jìn)行第一移動(dòng)處理；將所述活塞進(jìn)行第二移動(dòng)處理，以便使進(jìn)入注射室的所述稀釋液與裂解凍干粉和樣本進(jìn)行第一混合處理；將第一混合處理產(chǎn)物進(jìn)行裂解處理；將所述活塞進(jìn)行第三移動(dòng)處理；將所述活塞進(jìn)行第四移動(dòng)處理，以便使進(jìn)入注射室的所述裂解處理產(chǎn)物與剩余部分稀釋液進(jìn)行第二混合處理；將所述活塞進(jìn)行第五移動(dòng)處理，以便使第二混合處理產(chǎn)物進(jìn)入所述注射室；將所述活塞進(jìn)行第六移動(dòng)處理，以便使進(jìn)入注射室的所述第二混合處理產(chǎn)物與反轉(zhuǎn)錄酶和PCR原料凍干粉進(jìn)行第三混合處理；以及將第三混合處理產(chǎn)物進(jìn)行PCR溫度循環(huán)擴(kuò)增處理。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及利用PCR反應(yīng)系統(tǒng)進(jìn)行PCR反應(yīng)的方法。

背景技術(shù)

傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)過程一般都是分開進(jìn)行的，即先通過核酸提取試劑盒提取所需要的核酸，然后再將提取出的核酸和試劑混合添加到PCR反應(yīng)管中，最后再將PCR反應(yīng)管放入PCR儀器中進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，才能得出最終結(jié)果。傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)過程操作步驟繁瑣，工作效率低。

因此，簡便高效的PCR反應(yīng)過程還需要進(jìn)一步研究開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容

本申請(qǐng)是基于發(fā)明人對(duì)以下事實(shí)和問題的發(fā)現(xiàn)和認(rèn)識(shí)作出的：

傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)過程操作步驟繁瑣，工作效率低。究其原因，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，主要在于傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)過程中的每一步一般都需要專業(yè)人士進(jìn)行操作，并且這些操作一般都需要通過不同的儀器如核酸純化儀、全自動(dòng)工作站等分別進(jìn)行，另外，整個(gè)過程的操作也需要在標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下才能進(jìn)行。基于上述問題，發(fā)明人通過微流控管路將核酸的提取、核酸和試劑的混合以及最終PCR的反應(yīng)全部整合到了一個(gè)系統(tǒng)中，利用該系統(tǒng)進(jìn)行PCR反應(yīng)的方法實(shí)現(xiàn)了真正的全自動(dòng)化操作，解決了傳統(tǒng)PCR實(shí)驗(yàn)過程需要在專業(yè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境下由專業(yè)人士進(jìn)行操作的難題，減少了人為操作帶來的誤差，極大地提高了PCR反應(yīng)的工作效率，大大節(jié)約了人力資源成本。

為此，在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種利用PCR反應(yīng)系統(tǒng)進(jìn)行PCR反應(yīng)的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述PCR反應(yīng)系統(tǒng)包括：樣本容納單元，所述樣本容納單元內(nèi)設(shè)置有裂解凍干粉和樣本，并且所述樣本容納單元具有第一液體出/入口；稀釋液容納單元，所述稀釋液容納單元內(nèi)設(shè)置有稀釋液，并且所述稀釋液容納單元具有稀釋液出口；PCR反應(yīng)單元，所述PCR反應(yīng)單元內(nèi)設(shè)置有反轉(zhuǎn)錄酶和PCR原料凍干粉，并且所述PCR反應(yīng)單元具有PCR反應(yīng)液出口和裂解后的樣本混合液入口；以及活塞單元，所述活塞單元包括注射室和活塞，所述注射室具有第二液體出/入口，所述第二液體出/入口通過第一管路與所述第一液體出/入口相連，所述第二液體出/入口通過第二管路與所述稀釋液出口相連，所述第二液體出/入口通過第三管路與所述裂解后的樣本混合液入口相連，所述PCR反應(yīng)液出口通過第四管路與所述稀釋液出口相連；所述方法包括：將所述活塞進(jìn)行第一移動(dòng)處理，以便使部分稀釋液進(jìn)入所述注射室，所述稀釋液設(shè)置在所述稀釋液容納單元內(nèi)；將所述活塞進(jìn)行第二移動(dòng)處理，以便使進(jìn)入注射室的所述稀釋液與裂解凍干粉和樣本進(jìn)行第一混合處理，所述裂解凍干粉和所述樣本設(shè)置在所述樣本容納單元內(nèi)，所述第一混合處理是在所述樣本容納單元中進(jìn)行的；將第一混合處理產(chǎn)物進(jìn)行裂解處理，所述裂解處理是在所述樣本容納單元中進(jìn)行的；將所述活塞進(jìn)行第三移動(dòng)處理，以便使裂解處理產(chǎn)物進(jìn)入所述注射室；將所述活塞進(jìn)行第四移動(dòng)處理，以便使進(jìn)入注射室的所述裂解處理產(chǎn)物與剩余部分稀釋液進(jìn)行第二混合處理，所述第二混合處理是在所述稀釋液容納單元中進(jìn)行的；將所述活塞進(jìn)行第五移動(dòng)處理，以便使第二混合處理產(chǎn)物進(jìn)入所述注射室；將所述活塞進(jìn)行第六移動(dòng)處理，以便使進(jìn)入注射室的所述第二混合處理產(chǎn)物與反轉(zhuǎn)錄酶和PCR原料凍干粉進(jìn)行第三混合處理，所述反轉(zhuǎn)錄酶和PCR原料凍干粉設(shè)置在所述PCR反應(yīng)單元內(nèi)，所述第三混合處理是在所述PCR反應(yīng)單元中進(jìn)行的；以及將第三混合處理產(chǎn)物進(jìn)行PCR溫度循環(huán)擴(kuò)增處理，所述PCR溫度循環(huán)擴(kuò)增處理是在所述PCR反應(yīng)單元中進(jìn)行的。