[發明專利]利用土著微生物-植物聯合去除磷礦廢棄地中鉛污染的方法

有效

• 申請號: 201910941791.0
• 申請日: 2019-09-30
• 公開（公告）號: CN110523774B
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發明（設計）人: 肖春橋;王琪;張華香;池汝安
• 申請（專利權）人: 武漢工程大學
• 主分類號: B09C1/10
• 分類號: B09C1/10
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 閉釗

1.利用土著微生物-植物聯合去除磷礦廢棄地中鉛污染的方法，其特征在于包括以下步驟：

(a)從鉛污染的磷礦廢棄地采集土壤樣品，經富集、純化和篩選，得到土著高效溶磷微生物；

(b)對土著高效溶磷微生物進行耐鉛篩選及馴化培養，得到土著高效耐鉛溶磷微生物；

(c)從鉛污染的磷礦廢棄地收集土著植物種子，將其置于含鉛土壤中育苗，篩選得到土著鉛富集植物；

(d)將土著鉛富集植物栽種到鉛污染的磷礦廢棄地土壤中，接著將土著高效耐鉛溶磷微生物接種到土著鉛富集植物的根際土壤中，聯合培養一段時間即可；

步驟(a)具體過程如下：將采集的土壤樣品與無菌水按照100-200g:1L的比例混合均勻，過濾得到上清液；將上清液和溶磷微生物富集培養基按照1:3-5的比例混合，于28-35℃、120-170r/min轉速下恒溫搖床培養2-5天，富集得到土著溶磷微生物菌液；將富集得到的土著溶磷微生物菌液接種到溶磷微生物固體培養基中，于28-35℃倒置培養2-5天，得到混合土著溶磷微生物菌落；選擇單一的菌落利用劃線培養的方式于28-35℃純化培養2-5天，得到純化土著溶磷微生物菌株；將純化土著溶磷微生物菌株接種至溶磷微生物篩選培養基中，在28-35℃、120-170r/min轉速下振蕩培養5-7天，比較培養液的可溶磷含量高低，最終確定土著高效溶磷微生物；所述溶磷微生物篩選培養基按照重量份數計的配方為：葡萄糖8-10份，(NH₄)₂SO₄ 0.3-0.6份，MgSO₄·7H₂O 0.05-0.2份，KCl0.1-0.3份，酵母浸粉0.4-0.6份，FeSO₄·7H₂O 0.02-0.04份，低品位磷礦粉0.8-1.2份，蒸餾水1000份，pH為6-7；所述低品位磷礦粉中五氧化二磷的含量為5％-20％，粒徑為50-200目；

步驟(c)具體過程如下：調查鉛污染的磷礦廢棄地植物品種并取樣，將采集到的植物種子播種到含蛭石的無鉛土壤中，20-35℃育苗10-30天，選取發芽率高、生長狀態好的植物幼苗移栽至試驗花缽中，定時施澆鉛含量為10-50mg/L的溶液，自然光照下生長30-60天后采樣；分析檢測植物體內的鉛含量，確定生長狀態良好且植物體內鉛含量高的植物品種為土著鉛富集植物；其中調查確定的鉛污染的磷礦廢棄地植物品種包括藜、黑麥草、苦苣、野菊、艾草、狗尾草，最終確定的鉛富集植物為黑麥草、苦苣。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述溶磷微生物富集培養基按照重量份數計的配方為：葡萄糖8-10份，(NH₄)₂SO₄ 0.3-0.6份，MgSO₄·7H₂O 0.05-0.2份，KCl 0.1-0.3份，酵母浸粉0.4-0.6份，FeSO₄·7H₂O 0.02-0.04份，Ca₃(PO₄)₂0.8-1.2份，蒸餾水1000份，pH為6-7。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述溶磷微生物固體培養基按照重量份數計的配方為：葡萄糖8-10份，(NH₄)₂SO₄ 0.3-0.6份，MgSO₄·7H₂O 0.05-0.2份，KCl 0.1-0.3份，酵母浸粉0.4-0.6份，FeSO₄·7H₂O 0.02-0.04份，Ca₃(PO₄)₂0.8-1.2份，瓊脂粉10-20份，蒸餾水1000份，pH為6-7。