[發明專利]胰腺癌腹水小鼠動物模型的建立方法

在審

• 申請號: 201910938328.0
• 申請日: 2019-09-30
• 公開（公告）號: CN110622922A
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發明（設計）人: 覃山羽;姜海行;盧東誠;覃沁怡;胡榜利;雷榮娥
• 申請（專利權）人: 廣西醫科大學第一附屬醫院
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 45104 廣西南寧公平知識產權代理有限公司
• 代理人: 楊立華

本發明公開了一種胰腺癌腹水小鼠動物模型的建立方法，使用胰腺癌Panc02細胞進行C57BL/6小鼠腹腔注射，出現腹水后抽取腹水直接進行新一代小鼠腹腔注射，如此一直傳至第10代小鼠，同時提取第1代、第5代、第10代小鼠腹水中的胰腺癌細胞進行提純培養，將提純培養后的胰腺癌細胞進行體外實驗和小鼠體內實驗，摸索用于建模的最佳細胞量及提取的細胞代數。與現有裸鼠胰腺癌腹水模型相比，本發明首創了自主免疫的C57BL/6小鼠的胰腺癌腹水模型，其建模方法具有操作簡單方便、建模時間短、成功率高的特點，該法可快速高效地建立小鼠胰腺癌腹水模型，為闡明胰腺癌腹水的發病機制、診斷及治療提供合適的載體工具。

技術領域

本發明屬于動物模型的建立方法，尤其涉及一種胰腺癌腹水小鼠動物模型的建立方法。

背景技術

據專家預測，至2030年胰腺癌的死亡率可上升至所有惡性腫瘤的第二位。胰腺癌容易在疾病早期階段就發生遠處轉移，轉移至腹膜可伴隨惡性腹水和并發腸梗阻等癥狀，胰腺癌腹水的產生將嚴重影響患者的生活質量，縮短患者的生存時間，因此，臨床工作中的首要任務是闡明胰腺癌腹水的發病機制，探索抑制胰腺癌腹水的方法。

目前，胰腺癌腹水小鼠動物模型大多數為缺乏T細胞免疫的裸鼠胰腺癌腹水模型，裸鼠胰腺癌腹水模型用于探索胰腺癌腹水中的免疫因子水平及研究胰腺癌腹水的免疫治療具有局限性，而具有自主免疫的C57BL/6小鼠的胰腺癌腹水模型鮮見報道。現有建立胰腺癌腹水小鼠動物模型的方法大多為原位移植瘤法，方法操作復雜，難度大，建模成功率低。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種操作簡單方便、建模周期短且成功率高的胰腺癌腹水小鼠動物模型的建立方法。

為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案：

胰腺癌腹水小鼠動物模型的建立方法，使用胰腺癌Panc02細胞進行C57BL/6小鼠腹腔注射，出現腹水后抽取腹水直接進行新一批小鼠注射，同時提取g1、g5、g10小鼠腹水中的胰腺癌細胞進行提純培養，將提純培養后的胰腺癌細胞進行體外實驗和體內實驗，摸索用于建模的最佳細胞量及提取的細胞代數。

上述胰腺癌腹水小鼠動物模型的建立方法，使用胰腺癌Panc02細胞G0進行C57BL/6小鼠腹腔注射，出現腹水后提取腹水中的胰腺癌細胞進行提純培養，第一批注射胰腺癌細胞的小鼠命名為g1，從g1中提純培養獲得的胰腺癌細胞命名為G1，第二批注射含有胰腺癌細胞腹水的小鼠命名為g2。

胰腺癌Panc02細胞G0的注射細胞量為5×10⁶個/只，注射量為0.2ml；所述胰腺癌細胞G1的注射細胞量為1×10⁶個/只，注射量為0.2ml。