[發明專利]一種高效櫻花組培快繁的方法

在審

• 申請號: 201910938273.3
• 申請日: 2019-09-30
• 公開（公告）號: CN111837946A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 劉峰;王志龍;何月秋;李文;林立
• 申請（專利權）人: 寧波城市職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 寧波甬致專利代理有限公司 33228
• 代理人: 李迎春

本發明公開了一種高效櫻花組培快繁的方法，包括無菌苗的獲得、無菌苗的誘導培養、無菌苗繼代培養、生根培養、煉苗與移栽等步驟，通過多個步驟的合理搭配以及培養基的配方選擇，簡化了櫻花的生產流程，降低了生產的成本，通過本發明所繁育的櫻花成活率高、成長周期短，且本發明的方法步驟簡單，培養成本低，具有較高的商用價值及實用性，適合市場推廣。

技術領域

本發明專利涉及植物組織培養技術領域，具體指一種高效櫻花組培快繁的方法。

背景技術

櫻花作為觀賞性花木受到大眾的廣泛喜愛，櫻花是薔薇科櫻屬幾種植物的統稱，在《中國植物志》新修訂的名稱中專指“東京櫻花”，亦稱“日本櫻花”。櫻花品種相當繁多，數目超過三百種以上，全世界共有野生櫻花約150種，中國有50多種。全世界約40種櫻花類植物野生種祖先中，原產于中國的有33種。其他的則是通過園藝雜交所衍生得到的品種。櫻花為溫帶、亞熱帶樹種，性喜陽光和溫暖濕潤的氣候條件，有一定抗寒能力。對土壤的要求不嚴，宜在疏松肥沃、排水良好的砂質壤土生長，但不耐鹽堿土。根系較淺，忌積水低洼地。有一定的耐寒和耐旱力，但對煙及風抗力弱，因此不宜種植有臺風的沿海地帶。

櫻花種子自然條件下不易萌發，傳統的扦插、嫁接方法繁育系數低，成苗慢。隨著櫻花在園林綠化中的廣泛應用，市場對櫻花苗木需求量增加。因此傳統的繁殖方法已經遠遠不能滿足市場化需要。組織培養不僅可以增加繁育系數、成苗時間周期短的特點，而且還能夠保持親本的優良性狀，為櫻花的快速繁殖和工廠化育苗提供了一條切實可行的方法。在現有的組織快繁技術中，櫻花外植體的污染率高，外植體萌芽率30％-40％，增殖系數1-3，生根率不足50％，較低的成活率嚴重制約了櫻花在城市綠化及園林建設中的應用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種高效櫻花組培快繁的方法，進行工廠化生產以滿足市場的需求，解決目前市面上常規櫻花組織培養和快速繁殖方法外植體污染率高、萌芽率低、增殖系數小、生根率低的問題。

為了解決上述問題，本發明提供了一種高效櫻花組培快繁的方法，包括以下步驟：

(1)無菌苗的獲得：剪取健康粗壯、無病害和蟲害是一年生櫻花幼嫩枝條進行清洗、去葉片，將含有腋芽的枝條剪為長度3-5厘米；先使用流水清洗枝條1-2小時，后將枝條浸泡至1-2％的洗衣粉5-10分鐘，再使用流水清洗枝條1-2小時；在無菌環境下對枝條進行滅菌之后用吸水紙吸干多余的水分，將枝條切成帶一個腋芽的莖段即完成無菌苗獲得的處理；

(2)無菌苗的誘導培養：將步驟(1)處理后帶有腋芽的莖段接種于培養基中進行光培養，2周后腋芽開始萌動，形成小芽，莖段外植體萌芽率在80％以上；所述培養基成分為：MS+6-BA(6-芐氨基嘌呤)0.5-1.0mg/L+NAA(萘乙酸)0.1-0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L；

(3)無菌苗繼代培養：將步驟(2)處理后腋芽萌動形成的小芽轉接至增殖培養基上進行增殖繼代培養，4～5周后形成叢生芽；所述增殖培養基成分為：MS+6-BA 0.5-1.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L；

(4)生根培養：先將步驟(3)處理后叢生芽切割的高度大于2cm的櫻花組培苗保留3-4片展開葉，再基部葉片和葉柄切除干凈，最后接種到生根培養基中；所述生根培養基為：1/2MS+IBA(吲哚丁酸)0.5-1.0mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L；

(5)煉苗與移栽：常溫煉苗3～6天后，移栽入基質中培養4～5周，獲得櫻花的快速繁殖苗。

作為優選的方案，所述步驟(1)中，在無菌環境下進行滅菌的具體步驟為：將枝條置于無菌操作臺上用70％的酒精浸泡20～30s，之后用無菌水沖洗3～5次，再用1％次氯酸鈉浸泡10-15分鐘，最后再使用無菌水沖洗3～5次；