[發明專利]班氏跳小蜂葡糖脫氫酶GLD基因及其擴增用引物組合和克隆方法

有效

• 申請號: 201910934438.X
• 申請日: 2019-09-29
• 公開（公告）號: CN110592112B
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 張娟;黃俊;呂要斌;唐婭媛;李明江
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N9/04;C12N15/11;C12N15/10
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 呂紀濤

1.一種班氏跳小蜂葡糖脫氫酶GLD基因，其特征在于，所述GLD基因的核苷酸序列如SEQID No.6所示。

2.用于擴增權利要求1所述班氏跳小蜂葡糖脫氫酶GLD基因的引物組合，其特征在于，包括上游引物組合和下游引物組合，所述上游引物組合包括上游引物A-Gld-P 1F和上游引物A-Gld-P 2F，所述上游引物A-Gld-P 1F的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述上游引物A-Gld-P 2F的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；

所述下游引物組合包括下游引物A-Gld-P 2R和下游引物A-Gld-P 1.1R，所述下游引物A-Gld-P 2R的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述下游引物A-Gld-P 1.1R的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。

3.一種克隆權利要求1所述班氏跳小蜂葡糖脫氫酶GLD基因的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）提取班氏跳小蜂基因組DNA，得到擴增用模板DNA；

（2）用權利要求2所述的引物組合對所述擴增用模板DNA進行PCR擴增，得到擴增產物；

（3）對所述擴增產物進行測序，得到班氏跳小蜂葡糖脫氫酶GLD基因序列。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟（2）所述PCR擴增包括反應A’和反應B；

所述反應A’為：用上游引物A-Gld-P 1F和下游引物A-Gld-P 1.1R對所述擴增用模板DNA進行PCR擴增；

所述反應B為：用上游引物A-Gld-P 2F和下游引物A-Gld-P 2R對所述擴增用模板DNA進行PCR擴增。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述反應A’使用的酶為Taq酶。