[發明專利]一種同時檢測四項炎癥標志物的方法及其試劑盒

在審

• 申請號: 201910933208.1
• 申請日: 2019-09-29
• 公開（公告）號: CN110646620A
• 公開（公告）日: 2020-01-03
• 發明（設計）人: 王華林;張濤;謝進超;王萬朝;韓迪
• 申請（專利權）人: 湖北新縱科病毒疾病工程技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 11473 北京隆源天恒知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 鮑麗偉

本發明提供了一種同時檢測四項炎癥標志物的方法及其試劑盒，所述同時檢測四項炎癥標志物的試劑盒包括：微球試劑和生物素化抗體；其中，所述微球試劑包括四種編碼微球，且四種所述編碼微球上分別對應偶聯四種炎癥標志物的特異性抗體，四種所述炎癥標志物為PCT、IL?6、CRP和SAA；所述生物素化抗體包括四種所述炎癥標志物的檢測抗體，且所述檢測抗體上標記有熒光素。本發明能夠同時檢測出血清中PCT、IL?6、CRP和SAA四項指標的濃度，實現了指標的定量檢測，效率高，節約成本，且檢測的濃度范圍廣，所需樣品量少，批內批間實驗的變異系數小。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體而言，涉及一種同時檢測四項炎癥標志物的方法及其試劑盒。

背景技術

炎癥是一種具有血管系統的活體組織對損傷因子所發生的防御反應，是十分常見而又重要的基本病理過程，主要分為細菌性感染和病毒性感染。感染是臨床的常見病，如何早期識別、診斷、評價感染程度，是臨床治療中的基礎環節。研究表明C-反應蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)、白細胞介素-6(IL-6)、血清淀粉樣蛋白A(SAA)在感染早期和炎癥發展過程中具有重要的輔助診斷意義。

現有技術中一般通過單獨檢測CRP、PCT、IL-6或SAA來進行確診，檢測結果準確性低，且檢測時間長、操作復雜；因此亟需一種能夠同時檢測出這四種標志物的試劑。

發明內容

本發明解決的問題是現有技術中的試劑盒無法準確高效地同時檢測出CRP、PCT、IL-6和SAA這四種標志物。

為解決上述問題，本發明提供一種同時檢測四項炎癥標志物的試劑盒，包括微球試劑和生物素化抗體；其中，所述微球試劑包括四種編碼微球，且四種所述編碼微球上分別對應偶聯四種炎癥標志物的特異性抗體，四種所述炎癥標志物為PCT、IL-6、CRP和SAA；

所述生物素化抗體包括四種所述炎癥標志物的檢測抗體，且所述檢測抗體上標記有熒光素。

優選地，所述編碼微球是在空白微球中加入磁性顆粒以及兩種以上熒光材料制備得到的。

優選地，所述空白微球包括羧基修飾的聚苯乙烯微球。

優選地，所述熒光素為藻紅蛋白。

優選地，所述檢測抗體標記有生物素。

本發明提供的同時檢測四項炎癥標志物的試劑盒相比現有技術，具有如下有益效果：

(1)能夠同時檢測出血清中PCT、IL-6、CRP和SAA四項指標的濃度，實現了指標的定量檢測，效率高，節約成本。

(2)檢測的濃度范圍廣，濃度跨度從pg/ml至μg/ml，其中，降鈣素原檢出限不高于0.2ng/ml，C反應蛋白檢出限不高于0.5mg/L，白介素6檢出限不高于7pg/ml，血清淀粉樣蛋白A檢出限不高于10mg/L。

(3)所需樣品量少，10μL血清即可。

(4)檢測的精度高，檢測精度在-10％～+10％。

(5)本發明試劑盒具有較好的重復性和批間差，批內實驗的變異系數(CV)不大于10％，批間實驗的CV不大于15％。

(6)采用本發明的試劑盒，可以檢測到的C反應蛋白線性區間不窄于[0.5,80]mg/L，降鈣素原線性區間不窄于[0.3,20]ng/ml，白介素6線性區間不窄于[7,250]pg/ml，血清淀粉樣蛋白A線性區間不窄于[10,500]mg/L；線性區間內，線性相關系數∣r∣不小于0.990。

本發明還提供一種同時檢測四項炎癥標志物的方法，采用如上所述的同時檢測四項炎癥標志物的試劑盒進行檢測，包括如下步驟：