[發(fā)明專利]一種甘露聚糖酶及半乳糖苷酶復配水解槐豆膠生產(chǎn)半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910923809.4 | 申請日： | 2019-09-27 |
| 公開（公告）號： | CN110669805A | 公開（公告）日： | 2020-01-10 |
| 發(fā)明（設計）人： | 宋亞囝;馬翠萍;劉朵朵;羅學剛;李中媛;張同存 | 申請（專利權）人： | 天津科技大學 |
| 主分類號： | C12P19/14 | 分類號： | C12P19/14;C12P19/02;C12P19/12;C12P19/00 |
| 代理公司： | 12209 天津盛理知識產(chǎn)權代理有限公司 | 代理人： | 韓曉梅 |
| 地址： | 300457 天津市濱*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 甘露寡糖 半乳糖 甘露糖 半乳糖苷酶 甘露聚糖酶 底物 槐豆膠 制備 半乳甘露聚糖 調節(jié)混合物 刺槐豆膠 酶解過程 無污染物 混合物 沸水浴 復合酶 酶活力 上清液 水浴鍋 單糖 放入 復配 寡糖 耗能 水解 保溫 加熱 無毒 協(xié)同 生產(chǎn) | ||
1.一種甘露聚糖酶及半乳糖苷酶復配水解槐豆膠生產(chǎn)半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：步驟如下：
⑴制備質量濃度0.5％的刺槐豆膠底物；
⑵向底物中加入甘露聚糖酶和半乳糖苷酶的復合酶，該底物與復合酶的體積比為4：1，甘露聚糖酶、半乳糖苷酶的酶活力比為25:1，并調節(jié)混合物的pH為7.0；
⑶攪拌均勻后，放入44℃水浴鍋中保溫12±1h，將反應液沸水浴加熱10min，10,000-12,000rpm離心5-10min，收集上清液，即得半乳糖、甘露糖及甘露寡糖混合物。
2.根據(jù)權利要求1所述的甘露聚糖酶及半乳糖苷酶復配水解槐豆膠生產(chǎn)半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：所述步驟⑴的具體步驟如下：
用20mM檸檬酸緩沖液配置質量濃度0.5％槐豆膠底物，并于115℃下進行高壓蒸汽滅菌處理，待冷卻后與4℃冷藏備用。
3.根據(jù)權利要求1所述的甘露聚糖酶及半乳糖苷酶復配水解槐豆膠生產(chǎn)半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：所述步驟⑵中半乳糖苷酶為α-半乳糖苷酶Gal27A，甘露聚糖酶為甘露聚糖酶ManA。
4.根據(jù)權利要求1至3任一項所述的甘露聚糖酶及半乳糖苷酶復配水解槐豆膠生產(chǎn)半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：所述半乳糖、甘露糖及甘露寡糖混合物還經(jīng)過如下處理：
應用離子色譜技術對瓜爾豆膠水解產(chǎn)物進行定性和定量分析，具體條件為：
流動相組分：200mmol NaOH；色譜柱：Dionex Cabropac PA 1 150mm×3mm，6μm，Diono×PA 1Guard預柱，30mm×3mm，6μm；檢測器：GoldAg-AgCl，脈沖安培檢測器；流速：1mL/min；柱溫：30℃；進樣量：25μL。
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