[發明專利]一組用于鑒別紫靈芝和赤靈芝菌種的特異性分子標記及鑒別方法和應用

有效

• 申請號: 201910917363.4
• 申請日: 2019-09-26
• 公開（公告）號: CN110564885B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 盧江杰;劉玉洋;孟一君;何金宇;李振皓;王慧中;亢介玉
• 申請（專利權）人: 杭州師范大學;浙江壽仙谷植物藥研究院有限公司
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 劉元慧

本發明公開了一組用于鑒別紫靈芝和赤靈芝菌種的分子標記，上游引物GLMI001?F、GLMI002?F及GLMI003?F核苷酸序列分別如SEQ.ID No1、SEQ.ID No3、SEQ.ID No5所示，下游引物GLMI001?R、GLMI002?R及GLMI003?R核苷酸序列分別如SEQ.ID No2、SEQ.ID No4及SEQ.ID No6所示。本特異性分子標記GLMI001、GLMI002和GLMI003用于紫靈芝和赤靈芝菌種的鑒定檢測，規范靈芝菌種市場，檢測摻假行為，保證靈芝藥材安全；還可用于靈芝產品的檢測，對于保證靈芝種質純度，提高生產效率，具有很大的應用潛力和較好的經濟價值。

技術領域

本發明屬于靈芝菌種分子鑒定技術領域，具體涉及一組用于鑒別紫靈芝和赤靈芝菌種的特異性分子標記及鑒別方法和應用。

背景技術

靈芝在分類地位上隸屬于真菌界、擔子菌門、傘菌綱、多孔菌目、靈芝科、靈芝屬，廣泛分布在熱帶和亞熱帶地區。我國靈芝種質資源豐富，廣泛分布于吉林、河北、山西、河南、浙江、云南、貴州、廣東和廣西等省份。靈芝是我國傳統中藥材，有“九大仙草”之一的美稱，性微溫，氣味特殊，味微苦澀。靈芝在《中華人民共和國藥典(2015版)》中以靈芝屬真菌赤靈芝(Ganoderma lucidum)或紫靈芝(Ganoderma sinense)的干燥子實體入藥，其化學成分較為復雜，主要含有三萜類、多糖類、氨基酸多肽類、核苷類、呋喃類、生物堿類、油脂類及其微量元素類等，具有多種生理活性和藥理活性，如調節免疫、預防心血管系統疾病、抗腫瘤、抗病毒、降血糖和抗氧化等。但赤靈芝性溫而紫靈芝性平；赤靈芝適合入藥，紫靈芝適合日常保健和調理。而且相對于赤靈芝，紫靈芝更昂貴。

隨著人民生活水平的提高，對高品質靈芝的需求越來越大，所以現在越來越多的靈芝都是仿野生栽培，這也促進了靈芝優良品種的菌種培育、保藏和生產。當前有部分商家為獲取暴利未按《食用菌菌種管理辦法》進行生產和銷售，再加上靈芝的長期栽培以及雜交育種等導致靈芝分類混亂，菌種名稱不統一，很大程度上阻礙了靈芝產業的健康發展。作為靈芝產業中主要的兩個種，紫靈芝和赤靈芝在子實體階段通過外形容易區分，但是在菌種時期，兩者幾乎完全一樣，因此需要利用分子手段進行區分，從而保障靈芝產業的健康有序發展。

發明內容

針對現有技術中存在的問題，本發明設計的目的是為了規范靈芝菌種培育、保藏和生產，提供一組用于鑒別紫靈芝和赤靈芝菌種的分子標記及鑒別方法和應用。

本發明通過以下技術方案加以實現：

一組用于鑒別紫靈芝和赤靈芝菌種的特異性分子標記，該特異性分子標記的引物為GLMI001、GLMI002和GLMI003，各引物核苷酸序列如下：

上游引物GLMI001-F：5’-ACCCGGTGAAACAACA-3’，如SEQ ID No.1所示；

下游引物GLMI001-R：5’-GCAGTGAGTTTGGCTTAT-3’，如SEQ ID No.2所示；

上游引物GLMI002-F：5’-CGGACAGCGAACAGACG-3’，如SEQ ID No.3所示；

下游引物GLMI002-R：5’-GGCAGCAATGAGGACACC-3’，如SEQ ID No.4所示；

上游引物GLMI003-F：5’-AGCGACGCCGTCAACTC-3’，如SEQ ID No.5所示；

下游引物GLMI003-R：5’-AAGCAGCCACAGCCAACT-3’，如SEQ ID No.6所示。