[發(fā)明專利]一種惡性神經(jīng)鞘瘤異種移植小鼠模型的構(gòu)建方法及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910901498.1 | 申請日： | 2019-09-23 |
| 公開（公告）號： | CN110495422B | 公開（公告）日： | 2022-12-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 黎志宏;涂超;任曉磊;陳瑞奇;戚麟;謝鵬 | 申請（專利權(quán)）人： | 中南大學湘雅二醫(yī)院 |
| 主分類號： | A01K67/02 | 分類號： | A01K67/02;A61K49/00 |
| 代理公司： | 長沙歐諾專利代理事務(wù)所(普通合伙) 43234 | 代理人： | 歐穎;李艷華 |
| 地址： | 410011 湖南*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 惡性 神經(jīng) 鞘瘤異種 移植 小鼠 模型 構(gòu)建 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種惡性神經(jīng)鞘瘤異種移植小鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述方法包括先采集惡性神經(jīng)鞘瘤患者腫瘤組織塊，再在無菌條件下將新鮮的患者腫瘤組織塊異種原位移植進免疫缺陷小鼠NOD/SCID小鼠體內(nèi)，所述異種原位移植包括選用年齡在2～6周的免疫缺陷小鼠，小鼠性別與患者性別保持一致，將采集到的新鮮的患者腫瘤組織塊浸泡在含胎牛血清的無菌孵育液中，小鼠麻醉后固定，將患者腫瘤組織塊植入小鼠的腋下神經(jīng)鞘中，縫合切口，飼養(yǎng)小鼠使得其體內(nèi)腫瘤生長；植入小鼠體內(nèi)的所述惡性神經(jīng)鞘瘤患者腫瘤組織塊的單邊長度小于等于1mm；所述異種原位移植包括先在小鼠的腋下神經(jīng)鞘處作皮膚切口，分離腋下神經(jīng)鞘并開口，將患者腫瘤組織塊植入腋下神經(jīng)鞘中，然后縫合手術(shù)切口，飼養(yǎng)小鼠使得其體內(nèi)腫瘤生長后解剖小鼠，剝離瘤體得到P0代腫瘤瘤體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，待小鼠體內(nèi)腫瘤瘤體的體積增長至1500mm3時或42天后解剖小鼠，剝離瘤體稱重，部分瘤塊接種傳代。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，異種原位移植時小鼠的體重為8～20g，所述無菌孵育液中包含抗生素和DMEM培養(yǎng)基或RPMI-1640培養(yǎng)基，所述抗生素包含青霉素和鏈霉素。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括采用小動物活體成像儀觀察小鼠體內(nèi)惡性神經(jīng)鞘瘤大小。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括取P0代腫瘤瘤體異種原位移植進免疫缺陷小鼠體內(nèi)得到P1代腫瘤瘤體，取P1代腫瘤瘤體異種原位移植進免疫缺陷小鼠體內(nèi)得到P2代腫瘤瘤體，以此類推傳代。
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