[發明專利]一種基于近紅外發光稀土納米材料的免疫層析檢測方法

有效

• 申請號: 201910895003.9
• 申請日: 2019-09-20
• 公開（公告）號: CN110514825B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 李富友;劉青昀;馮瑋;吳勇
• 申請（專利權）人: 復旦大學;中山泰輝生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/68
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 趙徐平

本發明公開了一種基于近紅外發光稀土納米材料的免疫層析檢測方法，以近紅外發光稀土納米材料作為免疫熒光標記物標記識別抗體，進行免疫層析檢測；近紅外發光稀土納米材料具有如下特征：(1)激發光和發射光均位于700?1700nm的近紅外光區域；(2)激發波長小于發射波長，為正斯托克斯位移發光，且斯托克斯位移大于150nm；(3)熒光量子效率QY高于1％；(4)熒光壽命大于10微秒；(5)光穩定性優于有機染料。使用本發明方法進行免疫層析檢測，熒光標記物的穩定性更好、熒光發射更強，檢測結果具有更好的重復性。

技術領域

本發明屬于免疫層析檢測技術領域，具體涉及一種基于近紅外發光稀土納米材料的免疫層析檢測方法。

背景技術

血液等生物樣本對近紅外光的吸收和散射遠弱于可見光，且生物樣本在近紅外光區域內無明顯的自發熒光，使用近紅外作為檢測信號可以降低背景干擾、減少信號衰減。因此，近紅外發光材料逐漸被應用到免疫層析領域中。

目前大多數研究人員選擇近紅外發光有機染料用于免疫層析；然而近紅外有機染料在水溶液中發光量子效率通常非常低，且光學穩定性差，主要表現在易出現光漂白和光降解等現象，不可長時間放置在正常燈光照射下；此外，近紅外有機染料化學穩定性差，配制成溶液極易分解，不能長時間保存，通常會帶來發光強度的衰減或者發射波長的位移。因此使用近紅外有機染料作為熒光標志物時需要更加苛刻的檢測條件，且檢測結果的可重復性差。

與之相比，近紅外發光稀土納米材料穩定性良好，且發光強度幾乎不受溶劑、光照等外界因素的影響，有利于實現近紅外免疫層析的高靈敏檢測。然而現有的近紅外發光稀土納米材料發光量子效率非常低，通常低于1％，材料的發光亮度非常有限，對免疫層析檢測的靈敏度會造成較大影響。

因此，如何將近紅外發光稀土納米材料應用于免疫層析檢測中，提供一種背景熒光低、檢測信噪比高，檢測靈敏度高的檢測方法是本領域亟待解決的問題。

發明內容

本發明公開了一種利用正斯托克斯位移發光的近紅外發光稀土納米材料作為標記物進行免疫層析檢測；與已有的近紅外免疫層析方法相比，其熒光標記物的穩定性更好、熒光發射更強，檢測結果具有更好的重復性。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種基于近紅外發光稀土納米材料的免疫層析檢測方法，以近紅外發光稀土納米材料作為免疫熒光標記物標記識別抗體，進行免疫層析檢測；近紅外發光稀土納米材料具有如下特征：

(1)激發光和發射光均位于700-1700nm的近紅外光區域；

(2)激發波長小于發射波長，為正斯托克斯位移發光，且斯托克斯位移大于150nm；

(3)熒光量子效率QY高于1％；

(4)熒光壽命大于10微秒；

(5)光穩定性優于有機染料。

優選地，近紅外發光稀土納米材料激發光波長為730±10nm、800±10nm、915±10nm或980±10nm，發射光波長為890±50nm、980±50nm、1060±50nm、1150±50nm或1530±50nm。

優選地，近紅外發光稀土納米材料熒光壽命大于10微秒。

進一步優選地，近紅外發光稀土納米材料熒光壽命大于100微秒。

優選地，近紅外發光稀土納米材料尺寸小于200nm。

進一步優選地，近紅外發光稀土納米材料尺寸小于80nm。

進一步優選地，近紅外發光稀土納米材料斯托克斯位移大于500nm。

優選地，近紅外發光稀土納米材料包括內核，并且內核為無機基質摻雜離子；