[發明專利]一種葡萄新品種快速培育的方法

在審

• 申請號: 201910879850.6
• 申請日: 2019-09-18
• 公開（公告）號: CN110402753A
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發明（設計）人: 鐘海霞;師瑋;伍新宇;潘明啟;張付春;唐懷君;郝敬喆;周曉明;張雯;韓守安;謝輝;王敏;梅闖;許娟;孟阿靜
• 申請（專利權）人: 新疆農業科學院園藝作物研究所
• 主分類號: A01G17/02
• 分類號: A01G17/02;A01G13/00;A01H1/02;A01H4/00;C05G1/00;C05G3/00
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210
• 代理人: 吳國清

1.一種葡萄新品種快速培育的方法，其特征在于葡萄培育的方法按照以下步驟進行：

一、雜交：

1.1、父本花粉采集

5月上旬采集父本葡萄的花粉；

1.2、母本去雄

5月中旬將母本葡萄標記，去雄后套袋；

1.3、雜交授粉

母本去雄兩天后的早晨，用父本葡萄的花粉給去雄的母本葡萄授粉，間隔一天重復授粉一次；

二、雜交胚珠及成苗培養：

2.1、取胚

胚珠培養基：以Nitsch培養基為基本培養基，每升添加濃度為2.0mg/L IBA、濃度為0.5mg/L GA₃、濃度為0.5mg/L 6-BA和濃度為1.0g/L的活性炭各30ml、水解酪蛋白0.1g，分裝于玻璃三角瓶中，于120℃滅菌30min；

當年7月初，采集雜交后的果實，消毒濾干后切開果粒將胚珠挑入胚珠培養基中；

2.2、胚珠培養

在溫度為25℃、相對濕度60％、光強度2400lx、每天光照14h的條件下，將胚珠放入光照培養箱中進行離體培養60d；

2.3、切胚

胚萌發培養基：以Nitsch培養基為基本培養基，每升添加濃度為2.0mg/LIBA、濃度為0.5mg/L GA₃、濃度為0.5mg/L6-BA、濃度為0.5g/L的活性炭各30ml分裝于玻璃三角瓶中，于120℃滅菌30min；

當年9月初，將培養的胚珠切割開取胚乳放入胚萌發培養基；

2.4、胚萌發培養

在溫度為25℃、相對濕度60％、光強度2400lx、每天光照14h的條件下，將胚乳放入光照培養箱中進行離體培養至胚開始萌發長出胚芽和細根；

2.5、成苗培養

將胚芽接入添加IBA濃度為0.1mg/L、活性炭濃度為1.0g/L、蔗糖濃度為30g/L的1/2MS培養基中，每瓶1芽，分別標記，在溫度為25℃、相對濕度60％、光強度2400lx、每天光照14h的條件下，在培養箱中培養30d；

三、擴繁及移栽：

3.1、擴繁

將長有8～10片葉的幼苗剪成每芽一段，接到裝有MS培養基的試管中，分別標記，在組培室培養15d～25d繼續擴繁；

3.2、練苗

第二年2月中旬，選擇根為4～5條、長3～5cm、葉子為4～5片，莖稈粗壯，基部無愈傷組織的壯苗，將試管封口膜解開透氣鍛煉苗2～3天；

基質加水潤濕后滅菌，裝入底部穿洞透水的紙杯中，基質裝入量為紙杯體積的1/3；用無菌水沖洗幼苗根系后移栽到紙杯中，再加入1倍的基質，上扣口徑小于紙杯的透明塑料杯，分別標記；在組培室進行煉苗，溫度控制在18～25℃、相對濕度80％～90％、光照強度2400lx，每周澆灌1000倍稀釋的多菌靈和稀釋至30％的MS營養液各50ml；20天后，通過塑料杯斜放的方式，逐步擴大通風口；

3.3、移栽

第二年3月下旬，幼苗連同紙杯移栽到溫室中，分別標記，按照500ml/株灌足定根水并遮陰；15天后去除塑料杯和遮陰，20天為一周期灌水，同時每株補充10g尿素、10g磷酸鉀；每月葉面噴質量濃度為25％的多菌靈可濕性粉劑500倍液或百菌清水乳劑1000倍液，且多菌靈可濕性粉劑稀釋液與百菌清水乳劑稀釋液交替使用，多菌靈可濕性粉劑稀釋液與百菌清水乳劑稀釋液中加0.3％的尿素；同一胚珠擴繁的幼苗分2組進行管理，第一組組每株留1蔓，副梢留2葉反復摘心，株高達到2m摘心，用于性狀觀察；第二組組每株留1蔓，副梢留2葉反復摘心，株高達到0.5m摘心，5月中旬半木質化芽用于高接，取芽后幼苗管理同第一組；

3.4、高接

第二年5月下旬，采用綠枝嫁接技術，將溫室中第二組幼苗半木質化的芽高接到露地大樹上，分別標記；在第二年6月初開始，以20天為灌水周期，每月追施尿素200g/株+磷酸鉀100g/株，8月底結束；每嫁接芽留1新梢，副梢留2葉反復摘心，新梢達到2m摘心，用于性狀觀察；

四、鑒定

4.1、鑒定

第三年1月初，溫室升溫，按照溫室葡萄栽培管理技術要求管理，第三年2月上旬，對有果穗的株系進行標記和觀察；第三年5月份對有果實的株系進行品質評價，篩選出具備目標形狀的優株，優選單株保留種條組培擴繁；

同年4月中旬，對露地大樹高接的有果穗的株系進行標記和觀察；第三年8月份對有果實的株系進行品質評價，篩選出具備目標形狀的優株，優選單株保留種條組培擴繁；

4.2、高接

第三年5月下旬，采用綠枝嫁接技術，將步驟4.1溫室中篩選出的優株半木質化的芽高接到露地大樹上，分別標記，優選單株保留種條組培擴繁；

4.3、鑒定

第四年，重復4.1，對溫室中的雜交株和露地的高接株有果實的株系進行品質評價，篩選出具備目標形狀的優株，優選單株保留種條組培擴繁；

五、區試

第四年4月初在園土中定植優選單株繁育的組培苗管理同3.3、移栽第一組；

第五年，優株區試并進行植物學性狀觀測和果實評價，加強管理；

第六年，繼續優株區試并進行植物學性狀觀測和果實評價，加強管理；

第七年，繼續優株區試并進行植物學性狀觀測和果實評價，加強管理；完成區試獲得新品種。