[發明專利]一種核酸藥物復合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910877543.4
• 申請日: 2019-09-17
• 公開（公告）號: CN110478322B
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 丁寶全;劉建兵
• 申請（專利權）人: 國家納米科學中心
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K47/40;A61K31/7105;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種核酸藥物復合物，其特征在于，所述核酸藥物復合物由支鏈結構、修飾在所述支鏈結構上的功能元件以及連接所述支鏈結構的橋聯結構組裝形成；

所述支鏈結構包括超分子和連接在所述超分子上的核酸支鏈；

所述支鏈結構中的超分子包括β-環糊精；

所述功能元件通過主客體識別組裝在所述支鏈結構的超分子上；

所述功能元件包括修飾有超分子配體的功能核酸和/或功能多肽；

所述超分子配體包括金剛烷；

所述功能性核酸包括核酸適配子MUC1；

所述功能多肽包括內涵體逃逸肽；

所述橋聯結構包括核酸支鏈的互補鏈、核酸藥物以及連接所述互補鏈和核酸藥物的二硫鍵；

所述橋聯結構作為連接鏈將多個支鏈結構連接起來形成核酸藥物復合物。

2.根據權利要求1所述的核酸藥物復合物，其特征在于，所述核酸支鏈的核酸序列如SEQ ID NO:1～2所示。

3.根據權利要求1所述的核酸藥物復合物，其特征在于，所述核酸適配子MUC1包括如SEQ ID NO:3所示的核酸序列。

4.根據權利要求1所述的核酸藥物復合物，其特征在于，所述內涵體逃逸肽包括如SEQID NO:4所示的氨基酸序列。

5.根據權利要求1所述的核酸藥物復合物，其特征在于，所述橋聯結構的核酸支鏈的互補鏈如SEQ ID NO:5～6所示。

6.根據權利要求1所述的核酸藥物復合物，其特征在于，所述橋聯結構的核酸藥物包括靶基因的反義核酸。

7.根據權利要求6所述的核酸藥物復合物，其特征在于，所述反義核酸如SEQ ID NO:7～8所示。

8.根據權利要求1所述的核酸藥物復合物，其特征在于，所述支鏈結構、功能元件和橋聯結構的摩爾比為1:1:1～7。

9.一種如權利要求1-8任一項所述的核酸藥物復合物的制備方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)構建支鏈結構；

(2)構建功能元件；

(3)支鏈結構、功能元件和橋聯結構組裝形成核酸藥物復合物。

10.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述構建支鏈結構包括以下步驟：

(1’)以β-環糊精為超分子，將β-環糊精的伯醇羥基轉變為疊氮基團；

(2’)將氨基修飾的核酸支鏈分別與含有炔基的DBCO-NHS小分子反應，在核酸支鏈的末端修飾DBCO官能團；

(3’)將末端修飾有DBCO的核酸支鏈分別與含有疊氮基團的β-環糊精進行無銅點擊反應，得到所述支鏈結構。

11.根據權利要求10所述的制備方法，其特征在于，步驟(3’)所述末端修飾有DBCO的核酸支鏈與含有疊氮基團的β-環糊精的投料比為7～14:1。

12.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述構建功能元件包括將金剛烷成酰胺化交聯在所述功能核酸上，和/或將金剛烷成酰胺化固相合成在所述功能多肽上。

13.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)所述支鏈結構、功能元件和橋聯結構的摩爾比為1:1:1～7。

14.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)所述組裝的條件為：35～40℃孵育5～10min，降溫至0～4℃。

15.一種如權利要求1-8任一項所述的核酸藥物復合物在制備腫瘤治療藥物中的應用。

16.根據權利要求15所述的應用，其特征在于，所述腫瘤包括乳腺癌、肝癌、卵巢癌、前列腺癌、非小細胞癌、頭頸癌或非何金氏淋巴瘤中的任意一種。