[發明專利]厚殼貽貝IRAK-b基因及其用途

在審

• 申請號: 201910876190.6
• 申請日: 2019-09-17
• 公開（公告）號: CN110551738A
• 公開（公告）日: 2019-12-10
• 發明（設計）人: 劉慧慧;葛德隆;張立
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N9/12;C12Q1/6888;A61K38/45;A61P37/04
• 代理公司: 33213 杭州浙科專利事務所(普通合伙)
• 代理人: 吳秉中

本發明提供一種厚殼貽貝IRAK?b基因及其用途，屬于基因工程技術領域，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，全長為1815bp，括一個ORF序列1599bp，編碼532氨基酸，在厚殼貽貝免疫信號通路中起重要作用，能夠快速合成相應的免疫信號蛋白，抵抗外界應激源對機體自身的侵襲。在溶藻弧菌或副溶血性弧菌的感染下，厚殼貽貝IRAK?b基因表達量上調，可用于制備檢測厚殼貽貝病原菌感染的試劑。本發明厚殼貽貝IRAK?b基因編碼的蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，可利用本發明的厚殼貽貝IRAK?b基因生產重組厚殼貽貝IRAK?b基因蛋白，用作制備提高海洋軟體動物免疫力的組合物。

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，具體涉及一種厚殼貽貝IRAK-b基因及其用途。

背景技術

免疫系統（Immunity system）是生物經過長期進化和演變形成的免疫防御體系，包括先天性免疫系統（Innate immune system）和獲得性免疫系統（Adaptive immunesystem）。先天性免疫系統是機體抵抗病原微生物入侵的第一道天然屏障，受遺傳因素調節，較穩定，其對多類病原（如寄生蟲、細菌和病毒等）均有免疫保護作用。模式識別受體（Pattern recognition receptors, PRRs）在先天性免疫反應中作用重大，能特異性識別病原相關分子模式（Pathogen-associated molecular patterns, PAMPs），從而啟動先天性免疫系統和激活適應性免疫系統，引發針對所識別病原的免疫反應。病原體相關分子模式（pathogen-associated molecular pattern，PAMP）是細菌和病毒等病原微生物都具有保守結構域，而生物體識別病原體可依靠模式識別受體(pattern recognition receptor，PRR)。PRRs是由胚系基因編碼而成的主要表達于固有免疫細胞表面、功能上可識別PAMPs、進化上十分保守的受體分子，因此，PRRs對生物體的生存極為重要。Toll樣受體（Toll likereceptors，TLRs）是典型的PRRs，Toll樣受體識別PAMPs后，自身結構發生構象變化并二聚化，通過其分子結構中的TIR（Toll／IL-1R domain）功能域，在細胞內召募一些含有TIR結構域的接頭蛋白分子，如MyD88（myeloid differentiation factor 88）、TIRAP（ TIR domaincontaining adaptor protein）、TRIF (TIR domain containing adaptor inducing IFN-β) 和TRIF相關的接頭分子（TRIF-related adaptor molecule，TRAM），進一步激活下游信號分子，進而啟動先天免疫系統。MyD88是除TLR3外TLRs家族中激活炎癥反應的最常見的接頭分子。這類免疫反應主要依靠兩個不同的途徑，區別在于是否依賴MyD88，其中依賴MyD88激活NF-κB的信號通路對生物體防御病原菌侵害尤為重要。TLRs募集MyD88接頭信號后，會活化白細胞介素-1受體相關激酶（interleukin-1 receptor associated kinase，IRAK）家族，通過磷酸化后與TRAF6（IRAK receptor associated factor 6）相互作用，活化絲裂原活化蛋白激酶（Mitogen activated protein kinase，MAPK）和NF-κB (nuclear factorKB)，從而誘導炎癥反應啟動固有免疫系統。

厚殼貽貝（Mytilus coruscus）是一種重要的水生無脊椎動物經濟貝類，營養價值較高，廣泛分布于東海東海岸，尤其是舟山(中國)海岸。但近年來，由于人類行為的影響，海洋生態環境不斷惡化，致病菌得到足夠的營養，并迅速增加。致病菌引起厚殼貽貝的高死亡率。然而，關于該物種對病原菌挑戰反應的研究還很有限。

發明內容

本發明的一個目的在于提供一種在溶藻弧菌或副溶血性弧菌的感染下，基因表達量上調的厚殼貽貝IRAK-b基因。