[發(fā)明專(zhuān)利]無(wú)創(chuàng)識(shí)別/預(yù)警脂肪肝奶牛的新型生物標(biāo)記物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910873316.4
• 申請(qǐng)日: 2019-09-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110501443B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 師科榮;張璇;胡成長(zhǎng);王中華;閆振貴;王生軒;張樂(lè)天;李冉冉;徐忠金
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/06
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 濟(jì)南譽(yù)豐專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) 37240
• 代理人: 薛鵬喜

本發(fā)明公開(kāi)了一組無(wú)創(chuàng)識(shí)別/預(yù)警脂肪肝奶牛的新型生物標(biāo)記物，所述生物標(biāo)記物分別為：糞便中的L?α?氨基丁酸和山崳酸，尿液中的3?硝基酪氨酸。經(jīng)診斷能力驗(yàn)證，上述每一種標(biāo)記物的AUC值都比傳統(tǒng)的臨床血清生化指標(biāo)高，具有更高的臨床診斷應(yīng)用價(jià)值；而且，這三種生物標(biāo)記物的聯(lián)合診斷結(jié)果顯示出更高的診斷應(yīng)用價(jià)值。利用本發(fā)明的生物標(biāo)記物對(duì)脂肪肝奶牛進(jìn)行診斷、鑒別和監(jiān)測(cè)，不僅成本低、操作簡(jiǎn)單，而且是一種無(wú)創(chuàng)且非侵入性的檢測(cè)手段，符合動(dòng)物福利與健康養(yǎng)殖的理念，未來(lái)可廣泛應(yīng)用于奶牛的規(guī)模化養(yǎng)殖，促進(jìn)奶業(yè)產(chǎn)業(yè)的健康、高效發(fā)展。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分析化學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種無(wú)創(chuàng)識(shí)別/預(yù)警脂肪肝奶牛的新型生物標(biāo)記物。

背景技術(shù)

正常肝臟中含脂肪約5％(按濕重計(jì)算)，由于某種原因或多種原因而影響肝內(nèi)脂肪代謝過(guò)程，使脂肪在肝中積存超過(guò)肝臟的正常含量時(shí)，稱(chēng)為脂肪肝。肝內(nèi)細(xì)胞發(fā)生脂肪變性，組織學(xué)表現(xiàn)為肝細(xì)胞胞漿內(nèi)充滿(mǎn)脂肪滴。此病常發(fā)生于奶牛的產(chǎn)后，而且在高產(chǎn)奶牛更為多發(fā)。奶牛脂肪肝病作為奶牛圍產(chǎn)期常發(fā)的代謝紊亂性疾病之一，嚴(yán)重的還會(huì)引發(fā)酮病、產(chǎn)后癱瘓等，嚴(yán)重影響奶牛的產(chǎn)奶性能、繁殖性能、使用壽命。該病的發(fā)生率在奶牛圍產(chǎn)期尤為常發(fā)，發(fā)生比例相對(duì)較高(5-10％的奶牛患重度脂肪肝，30-40％患中度或輕度脂肪肝)，對(duì)奶業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。

脂肪肝作為常見(jiàn)的代謝紊亂疾病長(zhǎng)期存在，并且對(duì)乳制品行業(yè)造成相當(dāng)大的經(jīng)濟(jì)損失，但仍缺乏有效的診斷方法。目前唯一可靠的診斷方法就是肝臟活檢——奶牛活體取肝組織進(jìn)行脂肪含量測(cè)定。該方法是一種侵入性方法，對(duì)奶牛的健康產(chǎn)生雪上加霜的影響，不利于動(dòng)物福利；況且，預(yù)后不良還會(huì)導(dǎo)致并發(fā)性感染疾病。因此，尋求一種能夠滿(mǎn)足獸醫(yī)臨床和養(yǎng)牛生產(chǎn)實(shí)踐需要的非損傷、特異性高、靈敏度和準(zhǔn)確性好的診斷方法，已成為防治奶牛脂肪肝病急需突破的瓶頸。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的是提供一組可用于奶牛脂肪肝病無(wú)創(chuàng)識(shí)別或預(yù)警的代謝生物標(biāo)記物，利用本發(fā)明的生物標(biāo)記物對(duì)脂肪肝奶牛進(jìn)行診斷和鑒別，不僅成本低、操作簡(jiǎn)單，而且是一種無(wú)創(chuàng)且非侵入性的檢測(cè)手段，符合動(dòng)物福利與健康養(yǎng)殖的理念，未來(lái)可廣泛應(yīng)用于奶牛的規(guī)模化養(yǎng)殖，促進(jìn)奶業(yè)健康、高效發(fā)展。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明的第一方面，提供如下1)-3)至少一項(xiàng)所述的物質(zhì)作為生物標(biāo)記物在制備診斷奶牛脂肪肝病的試劑或試劑盒中的用途：

1)L-α-氨基丁酸(L-Alpha-aminobutyric acid)；

2)山崳酸(Behenic acid)；

3)3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine)。

其中，L-α-氨基丁酸和山崳酸為糞便中的小分子代謝標(biāo)記物，3-硝基酪氨酸為尿液中的小分子代謝標(biāo)記物。上述三種生物標(biāo)記物均能準(zhǔn)確的識(shí)別奶牛脂肪肝病，每一種生物標(biāo)記物的AUC值都比傳統(tǒng)臨床生化指標(biāo)高，而且，多個(gè)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，AUC比單個(gè)更接近于1，診斷效果更好；上述三個(gè)生物標(biāo)記物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，對(duì)奶牛脂肪肝病的識(shí)別效果最好。

由此，本發(fā)明優(yōu)選保護(hù)L-α-氨基丁酸、山崳酸和3-硝基酪氨酸作為生物標(biāo)記物組合在制備識(shí)別奶牛脂肪肝病的試劑或試劑盒中的用途。

本發(fā)明的第二方面，提供一種檢測(cè)奶牛代謝物中的生物標(biāo)記物含量的物質(zhì)在制備用于非侵入性識(shí)別奶牛脂肪肝病的產(chǎn)品中的用途。

所述奶牛代謝物包括：糞便和尿液。

所述奶牛代謝物中的生物標(biāo)記物包括：糞便中的L-α-氨基丁酸和山崳酸；尿液中的3-硝基酪氨酸。

非侵入性識(shí)別奶牛脂肪肝病的方法包括：

(1)收集來(lái)自待測(cè)奶牛的代謝物；

(2)檢測(cè)奶牛代謝物中的生物標(biāo)記物含量；