[發(fā)明專利]一種納米殼聚糖衍生物、其制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910872273.8
• 申請(qǐng)日: 2019-09-16
• 公開（公告）號(hào): CN110527024B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄒霞娟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號(hào): C08F251/00
• 分類號(hào): C08F251/00;C08F220/32;C08F8/12;C07K1/14;C07K1/22;C12N9/08
• 代理公司: 北京眾合誠(chéng)成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 史雙元

1.一種納米殼聚糖衍生物，其特征在于，所述納米殼聚糖衍生物是殼聚糖與烯酸環(huán)氧丙酯發(fā)生自聚接枝反應(yīng)的產(chǎn)物，再在堿性條件下發(fā)生水解反應(yīng)得到的，并且所述納米殼聚糖衍生物帶有活性羥基官能團(tuán)，顆粒直徑大小為50-600nm，其中所述烯酸環(huán)氧丙酯為甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯，所述堿性條件為碳酸鈉水溶液，所述納米殼聚糖衍生物的結(jié)構(gòu)式為：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米殼聚糖衍生物，其特征在于，所述反應(yīng)是一鍋法反應(yīng)完成。

3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的納米殼聚糖衍生物的制備方法，其特征在于，包括下列步驟：

(1)將殼聚糖溶于含有0.1-20wt％酸的水溶液，再與甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯混合，加入引發(fā)劑后進(jìn)行自聚接枝反應(yīng)，其中，所述殼聚糖的含量為1.5-2.5wt％，所述甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯的含量為2-10wt％，反應(yīng)溫度為40-100℃，反應(yīng)時(shí)間為0.5-4小時(shí)，得到中間體；

(2)在步驟(1)得到的所述中間體中，加入碳酸鈉水溶液，反應(yīng)溫度為50-80℃，反應(yīng)時(shí)間4-6小時(shí)，降至室溫后，過(guò)濾，用水洗滌至中性，得到納米殼聚糖衍生物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述引發(fā)劑為偶氮二異丁腈、正丁基鋰、過(guò)硫酸鉀、硝酸鈰銨、硫代碳酸-溴酸鉀、二高碘酸銅酸鉀、過(guò)硫酸氨或硫代硫酸鈉中的一種或多種，所述引發(fā)劑的加入量為反應(yīng)體系的1-5wt％。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述酸為甲酸或乙酸。

6.納米殼聚糖衍生物在富集和純化糖基化多肽方面的應(yīng)用，其特征在于，所述納米殼聚糖衍生物為權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的納米殼聚糖衍生物、或?yàn)闄?quán)利要求3-5任一項(xiàng)所述的制備方法獲得的納米殼聚糖衍生物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述富集和純化糖基化多肽的方法為，將酶解后的待分析物溶于上樣液中，將其加入到所述殼聚糖衍生物納米材料中進(jìn)行富集，洗滌后得到選擇性吸附有糖基化多肽的納米殼聚糖衍生物，直接用于質(zhì)譜分析或洗脫負(fù)載的糖基化多肽。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述上樣液為含有89％乙腈和1-3％三氟乙酸的水溶液。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述洗脫溶液為含有50％乙腈和0.5％三氟乙酸的水溶液。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述酶解操作所用的酶為胰酶、蛋白內(nèi)切酶Glu-C或糜蛋白酶。

11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述納米殼聚糖衍生物涂在芯片上進(jìn)行微量的糖基化多肽的富集和純化，或填充入色譜柱中進(jìn)行大規(guī)模的糖基化多肽的富集和純化。