[發明專利]畜禽肉及其制品中脫氫松香酸的檢測方法

在審

• 申請號: 201910864307.9
• 申請日: 2019-09-12
• 公開（公告）號: CN110646527A
• 公開（公告）日: 2020-01-03
• 發明（設計）人: 江豐;吳婉琴;范志勇;張莉;朱曉玲;朱正偉
• 申請（專利權）人: 湖北省食品質量安全監督檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 42212 武漢河山金堂專利事務所(普通合伙)
• 代理人: 胡清堂

本發明公開了一種畜禽肉及其制品中脫氫松香酸的檢測方法，該方法采用有機溶劑提取待測樣品中的脫氫松香酸，經萃取、過濾后，采用同位素稀釋液相色譜?串聯質譜法測定，通過標準工作曲線，實現對畜禽肉及其制品中脫氫松香酸的定性和定量分析。本發明建立了利用液相色譜?串聯質譜法檢測脫氫松香酸的方法，克服了現有的外標定量方法基質干擾強、定量準確性不足的缺點，具有干擾少，準確度高、靈敏度高的優點。

技術領域

本發明涉及分析檢測技術領域，特別涉及一種畜禽肉及其制品中脫氫松香酸的檢測方法。

背景技術

工業松香學名松香，是一種化工原料，主要成分為樹脂酸，還含有鉛等重金屬和有毒、有害物質。樹脂酸包括松香酸、脫氫松香酸和其它與松香酸互為同分異構體的樹脂酸。

大量研究表明，在使用松香脫毛時，松香酸和脫氫松香酸通過畜禽胴體表皮毛孔殘留在表皮組織中，并且后續加工方式(腌制蒸煮烘烤等)難以將其有效去除。松香酸和脫氫松香酸及其氧化產物是皮膚接觸過敏原，導致人體上皮細胞和成纖維細胞生物活性顯著下降，以及人體紅細胞和多核性白細胞壞死。而且，使用松香脫毛的家禽還會導致其他有害物質，如鉛和毒素進入人體，從而對肝臟和腎臟造成傷害甚至是致癌。因此，松香是國家明令禁止的畜禽脫毛助工劑。

但是，在現階段我國的食品安全國家監督抽檢以及風險監測中均未對畜禽肉及其制品中的非法使用松香進行監測。在現有技術中。通常是通過研究畜禽肉及其制品中松香酸來對松香進行定性和定量的，如發明專利CN 103235079A公開了一種畜禽肉表皮中松香酸含量的分析方法，其采用稀堿溶液提取，固相萃取凈化后，用高效液相色譜-紫外法(HPLC-UV)分析；由于液相色譜對松香酸以及與松香酸互為同分異構體的其它樹脂酸的分離效果較差，導致該方法所分析的松香酸實際為松香酸、山達海松酸、異海松酸等松香酸同分異構體樹脂酸之和，不能準確定性定量；此外該專利采用外標法定量，由于畜禽肉樣品中的脂肪干擾物質含量高，導致外標法定量過程中基質干擾強，限制了定量測定的準確性。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種畜禽肉及其制品中脫氫松香酸的檢測方法，該方法通過內標法利用同位素稀釋液相色譜-串聯質譜法測定脫氫松香酸的含量，從而實現對畜禽表皮中殘留的松香進行識別和確證。

為了實現上述目的，本發明具體采用以下技術方案：

一種畜禽肉及其制品中脫氫松香酸的檢測方法，包括以下步驟：

S1、稱取粉碎后的待測樣品，置于離心管中，加入內標工作液和乙腈溶液，超聲后離心，取上清液加水混勻，即為凈化液；

S2、依次用乙腈、水活化固相萃取柱，取步驟S1所述凈化液加入固相萃取柱，用乙腈水溶液淋洗，抽干后，用甲醇溶液洗脫，收集洗脫液并用甲醇定容，渦旋，經濾膜過濾后的濾液為待測液；

S3、配制系列含有同位素內標的脫氫松香酸標準工作溶液，采用同位素稀釋液相色譜-串聯質譜法測定標準工作溶液，得到標準工作曲線；

S4、采用與步驟S3相同的方法測量步驟S2所述待測液，并根據標準工作曲線計算得到待測液中脫氫松香酸的含量。

優選的，步驟S1所述內標工作液為脫氫松香酸-6,6-D₂甲醇溶液。

優選的，步驟S2所述固相萃取柱的規格為200mg/mL。

優選的，所述系列標準工作溶液的配制方法為：先分別配制1mg/mL脫氫松香酸標準儲備液和1mg/mL同位素內標儲備液，再分別稀釋成10μg/mL的標準中間液和為20μg/mL的內標中間液，最后分別準確吸取標準中間液適量，加入50μL內標工作液，用甲醇溶液稀釋成5～400ng/mL系列標準工作溶液。

優選的，步驟S3所述標準工作溶液的檢測方法具體為：