[發明專利]一種Anti CD70 CAR-T細胞及其制備方法與應用有效
| 申請號： | 201910857176.1 | 申請日： | 2019-09-11 |
| 公開（公告）號： | CN110592023B | 公開（公告）日： | 2020-09-04 |
| 發明（設計）人： | 郭志剛;紀鋒;劉蕊;鄔婷;李恩潔;李露露;李夢晗;胡志剛 | 申請（專利權）人： | 浙江藍盾藥業有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 楊曉莉 |
| 地址： | 312030 浙江省紹興*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 anti cd70 car 細胞 及其 制備 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種Anti CD70 CAR-T細胞，其特征在于，所述CAR-T細胞以CD70結構域為靶點，在T淋巴細胞內表達SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白；所述T淋巴細胞來源于人外周血分離的PBMC中；所述SCFV-CD8TM4-1BB-CD3ζ融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
2.權利要求1所述Anti CD70 CAR-T細胞的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）合成和擴增SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白基因，將所述SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白基因克隆到慢病毒表達載體上；
（2）利用慢病毒包裝質粒和步驟（1）得到的慢病毒表達載體質粒感染293T細胞，包裝和制備慢病毒；
（3）分離T淋巴細胞，培養擴增，利用步驟（2）得到的慢病毒感染T淋巴細胞，使所述T淋巴細胞表達SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白，得到Anti CD70 CAR-T細胞。
3.權利要求1所述Anti CD70 CAR-T細胞在制備治療高表達CD70分子的腫瘤的藥物中的應用，所述腫瘤為腎癌、腦膠質瘤。
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