[發(fā)明專利]一種抗肝素干擾的CKMB測(cè)定試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910851875.5
• 申請(qǐng)日: 2019-09-10
• 公開（公告）號(hào): CN110554179B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林源;蒲建文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川新健康成生物股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/53
• 分類號(hào): G01N33/53;G01N33/577;G01N33/70
• 代理公司: 成都行之專利代理事務(wù)所(普通合伙) 51220
• 代理人: 唐邦英

本發(fā)明公開了一種抗肝素干擾的CKMB測(cè)定試劑盒，包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1包括以下濃度組分：咪唑：7?10g/L，乙酸：2?5ml/L，乙酸鎂：3.2?4.1g/L，氯化鈣：2?5g/L，葡萄糖：4?7g/L，EDTA：0.5?2g/L，TX?100：0.1％，NAC：3?5g/L，ADP：1?2g/L，AMP：0.5?1g/L，Ap5A：8?12mg/L，β?NAD：1.5?2.0g/L，HXK：2?4KU/L，CKMM單抗：1.5?1.8ml/L；所述試劑R2包括以下濃度組分：CAPSO：4?5g/L，磷酸肌酸：48?51g/L，NaOH：0.1?0.2g/L，G6pDH：18?25KU/L，月桂二甲基氧化胺：0.5％。本發(fā)明通過在R1試劑中添加濃度為2?5g/L的氯化鈣，在R2試劑中采用濃度為0.5％的月桂二甲基氧化胺替代TX?100作為表面活性劑，使肝素抗凝管樣本測(cè)定結(jié)果回復(fù)到正常測(cè)定狀態(tài)，抗凝管所測(cè)定結(jié)果與血清管相比，結(jié)果不再出現(xiàn)負(fù)值，與血清管結(jié)果一致。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及肌酸激酶同工酶測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗肝素干擾的CKMB測(cè)定試劑盒。

背景技術(shù)

肌酸激酸(CK)廣泛存在于各種組織中，CK是由M(肌肉)型和B(腦)型兩種亞單位組成的二聚體酶，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)共有三種同工酶：CK-MM、CK-MB、CK-BB。CK-MB是重要的心肌標(biāo)志物，主要用于急性心肌梗死診斷，也用于心肌梗死面積評(píng)估。急性心肌梗死胸痛發(fā)作后，血清中CK-MB上升，先于總活力升高，24h達(dá)峰值，36h內(nèi)其波動(dòng)曲線與總活力相平行，至48h消失。目前常用的CK-MB測(cè)定方法為免疫抑制法，用特異的抗CK-M抗體抑制CK-M的活性，在340nm波長處，通過連續(xù)監(jiān)測(cè)吸光度的上升速率，測(cè)定CK-B的活性，將CK-B活性測(cè)定值乘以2，即可計(jì)算出樣本中CK-MB的活性。

肌酸激酶同工酶(CKMB)測(cè)定試劑盒是一個(gè)目前市面上較成熟，大多數(shù)IVD廠家均已注冊(cè)的常規(guī)項(xiàng)目。現(xiàn)有的肌酸激酶同工酶(CKMB)測(cè)定試劑盒存在以下缺陷：當(dāng)用肝素管作為抗凝管時(shí)，所采集的血漿比相同條件下的血清管測(cè)定結(jié)果偏低，且有負(fù)值出現(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種抗肝素干擾的CKMB測(cè)定試劑盒，使肝素抗凝管所測(cè)定結(jié)果與血清管相比，結(jié)果不再出現(xiàn)負(fù)值，與血清管結(jié)果一致。

本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種抗肝素干擾的CKMB測(cè)定試劑盒，包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1包括以下濃度組分：

咪唑：7-10g/L，乙酸：2-5ml/L，乙酸鎂：3.2-4.1g/L，氯化鈣：2-5g/L，葡萄糖：4-7g/L，EDTA：0.5-2g/L，TX-100：0.1％，NAC：3-5g/L，ADP：1-2g/L，AMP：0.5-1g/L，Ap5A：8-12mg/L，β-NAD：1.5-2.0g/L，HXK：2-4KU/L，CKMM單抗：1.5-1.8ml/L；

所述試劑R2包括以下濃度組分：

CAPSO：4-5g/L，磷酸肌酸：48-51g/L，NaOH：0.1-0.2g/L，G6pDH：18-25KU/L，月桂二甲基氧化胺：0.5％。

本發(fā)明所述咪唑?yàn)榫彌_液，提供反應(yīng)進(jìn)行的離子強(qiáng)度和酸堿度，所述乙酸用于調(diào)節(jié)pH，氯化鈣抗肝素干擾試劑，所述EDTA為絡(luò)合劑，絡(luò)合可能存在的微量重金屬離子，所述TX-100為表面活性劑，增加液體的表面活性，所述NAC為N-乙酰半胱氨酸，提供還原性巰基，使樣本中肌酸激酶具有活性，所述ADP為二磷酸腺苷，所述AMP為一磷酸腺苷，為試劑抗干擾成份，抑制樣本中腺苷酸激酶AK的干擾，所述Ap5A為5磷酸二腺苷，抑制樣本中腺苷酸激酶AK的干擾，所述β-NAD為氧化型輔酶Ⅱ，所述HXK為己糖激酶，所述CKMM單抗。