[發明專利]同時鑒定同株煙草的煙草普通花葉病與青枯病抗性的方法

有效

• 申請號: 201910851421.8
• 申請日: 2019-09-10
• 公開（公告）號: CN110506596B
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發明（設計）人: 孫學永;雷強;肖勇;屈建康;祖朝龍;李斌;余祥文;張建會;楊興有;馮長春;謝云波;王勇;高峻;劉東陽;李斌;謝明;羅琳;拓陽陽;屈靖雄;龍崗;陳樹鴻;孫志平;葉朝興
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院煙草研究所;中國煙草總公司四川省公司
• 主分類號: A01G22/45
• 分類號: A01G22/45;A01G7/06;C12Q1/18;C12R1/38;C12R1/94
• 代理公司: 重慶市信立達專利代理事務所(普通合伙) 50230
• 代理人: 陳炳萍

本發明涉及煙草病害抗性鑒定技術領域，公開了同時鑒定同株煙草的煙草普通花葉病與青枯病抗性的方法，包括選擇和培育青枯病病圃、煙草普通花葉病病葉的選取與保存、煙草無病壯苗的培育與移栽、接種煙草普通花葉病及帶毒檢測、選擇煙草青枯病和煙草普通花葉病的抗病對照和感病對照和分別采集煙草青枯病和煙草普通花葉病的發病狀況數據。本發明利用煙草普通花葉病和煙草青枯病兩種病害的發病部位及最佳發病條件具有明顯差異的特征，實現了在一個煙草生長周期對同一株煙草植株同時鑒定煙草普通花葉病和青枯病兩種病害抗性的方法的研究，與現有技術相比，本發明節約了試驗成本，減少了田間種植面積，提高了土地利用率，同時提高了抗性鑒定的準確性。

技術領域

本發明涉及煙草病害抗性鑒定技術領域，具體涉及同時鑒定同株煙草的煙草普通花葉病與青枯病抗性的方法。

背景技術

煙草普通花葉病(TMV)、煙草青枯病是在煙草生產中有重要影響的兩種病害，選育推廣抗病品種是緩解病害對生產影響的經濟有效環保的方法，煙草種質(品種)抗性鑒定是抗病品種選育的必要措施。目前煙草TMV抗性多采用煙株接種田間或室內鑒定的方法，煙草青枯病的抗性鑒定多采用病圃鑒定的方法。兩者的鑒定方法都較為成熟，在抗性育種中也得到廣泛的應用，但煙草農業生產對煙草育種提出了更高的要求，兼抗煙草TMV及青枯病品種的選育是這一要求之一，這同時對抗性鑒定的方法提出了更高的要求。

目前，對同一批煙草品種的煙草TMV抗性鑒定和煙草青枯病抗性鑒定是分開鑒定的，即對同一份煙草種質(品種)分別進行兩種病害的鑒定，得出抗性鑒定數據為單獨發病的結果，故而必須在大田種植至少兩份煙草植株。由此產生的缺陷是：不能對同一份煙草材料同時進行兩種病害的抗性鑒定。這一缺陷不僅增加了田間種植面積，增加了試驗成本，而且由于一些選育品種可能正在出現一些分離群體，而分離群體中的每一份植株都不相同，導致抗性鑒定的結果不能兼顧兩種病害的抗性鑒定。考慮到上述兩種病害的發病部位及最佳發病條件具有明顯差異，煙草花葉病(TMV)為葉片類病害，適合其發生的溫度一般為25-27℃，氣溫在28-30℃時發病最盛，在高溫情況下則會出壞死點和斑塊；而煙草青枯病為典型的維管束類根莖類病，病害流行需要更高的溫度(30℃以上)和更高的濕度(90％以上的相對濕度)，最適發病溫度是34℃。

而在煙草農業生產中各種病害往往混合發生，因此，發明人據此欲研發同時鑒定同株煙草的煙草普通花葉病與青枯病抗性的方法。

發明內容

基于以上問題，本發明提供一種可節約試驗成本、減少田間種植面積、實現對同一株煙草植株同時鑒定煙草普通花葉病和青枯病兩種病害抗性的同時鑒定同株煙草的煙草普通花葉病與青枯病抗性的方法。

為解決以上技術問題，本發明提供了同時鑒定同株煙草的煙草普通花葉病與青枯病抗性的方法，包括以下步驟：

S1：選擇和培育青枯病病圃

選擇成熟的煙草青枯病病圃或培育病圃，在病圃上種植煙草青枯病感病品種，當煙草青枯病感病品種在成株期的發病率達到100％、病情指數≥50％、田間發病均勻時即代表煙草青枯病病圃培育成功；

S2：煙草普通花葉病病葉的選取與保存

從患有典型煙草普通花葉病的煙草植株上摘取攜帶有普通花葉病病毒的煙草病葉，保存備用；

S3：煙草無病壯苗的培育與移栽

選取需要進行煙草普通花葉病與煙草青枯病抗性鑒定的煙草種質種子進行播種，利用漂浮育苗方法或濕潤育苗方法培育出煙草無病壯苗，隨后將煙草無病壯苗移栽至步驟S1中培育成功的煙草青枯病病圃中栽培；

S4：接種煙草普通花葉病及帶毒檢測