[發明專利]一種知母甾體皂苷化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910851036.3
• 申請日: 2019-09-10
• 公開（公告）號: CN110627861B
• 公開（公告）日: 2022-02-15
• 發明（設計）人: 黃雪峰;張敏杰;趙云芳
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00;A61P35/00;A61K31/7048
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 黃欣

本發明公開了一種知母甾體皂苷化合物及其制備方法和該化合物在制備抗腫瘤藥物中應用。該化合物為螺甾烷醇型甾體皂苷，分子式為C₄₅H₇₄O₁₇，分子量為886。該化合物由藥用植物知母經75%乙醇提取，水飽和的正丁醇萃取，采用大孔吸附樹脂、硅膠柱色譜、ODS反相柱色譜、凝膠柱色譜等多種方法分離純化而得。MTT實驗結果表明，該化合物對人乳腺癌細胞株(MCF?7)、人肝癌細胞株(HepG2)有顯著的抗腫瘤活性，有望成為抗腫瘤候選藥物。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種知母甾體皂苷化合物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中應用。

背景技術

癌癥作為人類死亡的主要因素，目前已經成為全球性的公共健康問題。因為癌癥具有死亡率高、治療效率低、難以控制等特點，所以許多科學家致力于開發新的治療方法和新型化療策略用于治療各種癌癥。但由于有些治療方案具有明顯的副作用以及高昂的治療費用，所以近年來各國將目光投向天然藥物。

天然藥物以其作用靶點廣、低毒的優勢，逐漸成為癌癥治療藥物研究的焦點，且在癌癥治療方面取得了較大進展。目前，臨床上應用的許多藥物都直接或間接來源于天然產物，天然產物不僅可以作為藥物半合成的先導化合物，而且可以作為藥物合成的模板，為新藥設計提供新穎的思路。天然藥物的生物活性成分逐漸顯示出了獨特的優勢和廣闊的應用前景。

知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)，又名毛知母，為百合科知母屬植物知母的干燥根莖，主要分布在我國河北省和安徽省，具有清熱瀉火、滋陰潤燥的功效，可用于熱病煩渴，肺熱燥咳，骨蒸潮熱，內熱消渴，腸燥便秘。研究發現，知母中主要含有甾體皂苷類、多糖類、黃酮類、木質素等成分，其中甾體皂苷及其苷元是其主要生物活性成分，具有抗腫瘤、抗炎、抗病毒、抗真菌等多種藥理活性，在根莖中含量約為總成分的6％。本發明所涉及的甾體皂苷化合物及其活性，迄今為止尚未發現有專利或文獻報道。

發明內容

本發明的目的是一種從知母根莖中提取分離得到的新甾體皂苷及其制備方法和在抗腫瘤方面的應用。

一種知母甾體皂苷化合物，其結構式如式I所示：

上述甾體皂苷化合物，其母核為薩爾薩皂苷元，屬于螺甾烷醇型甾體；甾體3位所連糖基依次為半乳糖基、葡萄糖基、鼠李糖基，糖基連接方式均為1→2位連接。

上述甾體皂苷化合物的制備方法，包括以下步驟：

步驟1，取知母干燥根莖，用乙醇加熱回流提取，濃縮得浸膏狀乙醇提取物；

步驟2，將乙醇提取物混懸于純凈水中得混懸液，用石油醚、乙酸乙酯、水飽和的正丁醇依次分別萃取，將萃取液濃縮得到三個部位的浸膏；

步驟3，將正丁醇部位浸膏經大孔吸附樹脂粗分，用體積比為10:90-95:5的乙醇-水進行第一次梯度洗脫，洗脫物經硅膠柱色譜粗分，再用體積比為20:1-1:1的二氯甲烷-甲醇進行第二次梯度洗脫，洗脫物經第一次ODS反相柱色譜分離，用體積比為30:70-100:0的甲醇-水進行第三次梯度洗脫，然后洗脫物經第二次ODS反相柱色譜分離，用體積比為30:70-100:0的甲醇-水進行第四次梯度洗脫，洗脫物經凝膠柱色譜分離，甲醇洗脫后純化得到甾體皂苷化合物。

進一步地，步驟1中所述乙醇為體積濃度為75％的乙醇水溶液，每1kg知母干燥根莖用5L乙醇水溶液(75％)；回流提取次數為3次，每次提取時間為3h。

進一步地，步驟2中是采用石油醚、乙酸乙酯、水飽和的正丁醇依次萃取，其中每次萃取時有機溶劑體積與混懸液體積相同。