[發明專利]基于miRNA檢測的試劑盒及其在癌癥早期篩查中的應用

有效

• 申請號: 201910848550.1
• 申請日: 2019-09-09
• 公開（公告）號: CN110564854B
• 公開（公告）日: 2023-09-29
• 發明（設計）人: 陳松峰;徐濤;鄒恒
• 申請（專利權）人: 晶準生物醫藥集團有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113
• 代理公司: 深圳中一聯合知識產權代理有限公司 44414
• 代理人: 張楊梅

1.基于miRNA檢測的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含MIR202、MIR508、MIR509-3、MIR205、MIR182、MIR513C、MIR183及MIR513B這八種miRNA的引物；

所述八種miRNA的引物包括反轉錄引物、qPCR正向引物和qPCR反向引物；

所述反轉錄引物進行反轉錄的程序包括：第一步16℃?30min，第二步42℃?30min，第三步85℃5min；

所述qPCR正向引物和qPCR反向引物進行PCR擴增的程序包括：第一步95℃?10min，第二步95℃?15s，第三步60℃?60s，其中，第二和第三步40次循環；

其中所述八種miRNA的反轉錄引物依次為：

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTTCCCA，

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTCTACT，

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCATGAT，

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACGAACTT，

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTAGTTG，

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTCTTCT，

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTTATGG，

5'-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACTCCTCT，

所述八種miRNA的qPCR正向引物依次為：

GUCCAGUUUUCCCAGGAAGAGGTATAGGGCA，

GUCCAGUUUUCCCAGGATGATTGTAGCCTTTTGG，

GUCCAGUUUUCCCAGGATACTGCAGACGTGGCA，

GUCCAGUUUUCCCAGGAGATTTCAGTGGAGTG，

GUCCAGUUUUCCCAGGATGGTTCTAGACTTGC，

GUCCAGUUUUCCCAGGATAAATTTCACCTTTCTG，

GUCCAGUUUUCCCAGGAGTGAATTACCGAAGGG，

GUCCAGUUUUCCCAGGAAAATGTCACCTTTTTG，

所述八種miRNA的qPCR反向引物均為：TGGTGTCGTGGAGTCG。

2.如權利要求1所述的基于miRNA檢測的試劑盒，其特征在于，所述基于miRNA檢測為癌癥早期的檢測。

3.如權利要求2所述的基于miRNA檢測的試劑盒，其特征在于，所述癌癥選自卵巢癌。

4.如權利要求1或2所述的基于miRNA檢測的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含以下一種或者多種試劑：

用于反轉錄的試劑；

利用所述引物進行多重PCR反應的試劑；

用于處理擴增產物以使得擴增產物能用于分析的試劑。

5.如權利要求4的基于miRNA檢測的試劑盒，其特征在于，用于反轉錄的試劑包括dNTPs、反轉錄酶、反轉錄緩沖液、MgCl₂、RNA酶抑制劑、DEPC水。