[發明專利]富集細胞并對細胞著色的流體控制裝置及方法

在審

• 申請號: 201910846376.7
• 申請日: 2019-09-09
• 公開（公告）號: CN110596102A
• 公開（公告）日: 2019-12-20
• 發明（設計）人: 唐勇
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: G01N21/84
• 分類號: G01N21/84;G01N21/64;G01N1/34;G01N1/30
• 代理公司: 44245 廣州市華學知識產權代理有限公司
• 代理人: 黃媛君

本發明公開了富集細胞并對細胞著色的流體控制裝置及方法，該裝置包括過濾腔體、轉盤、樣本室、預裝液室以及廢液室，過濾腔體可拆卸安裝于轉盤上，樣本室和多個預裝液室均勻安裝于過濾腔體的圓周方向，廢液室安裝于轉盤的底部。本發明的方法通過推拉活塞產生壓力差，旋轉過濾腔體形成通道將流體流入過濾腔體并實行過濾，過濾后細胞富集在微孔濾膜上，并對微孔濾膜上的細胞進行著色。本發明在著色過程中定量加液，減少了隨機性，提高了重復性，也能避免操作人員多次接觸樣本，產生風險。本發明涉及醫學樣本處理技術領域。

技術領域

本發明涉及醫學樣本處理技術領域，具體涉及富集細胞并對細胞著色的流體控制裝置及方法。

背景技術

對體液樣本中的原核或真核細胞進行制片并鏡檢觀察是醫學檢驗中診斷疾病的常用手段，也是生物學研究中的重要手段，為了提高診斷敏感性和易于觀察，制片前常對樣本中細胞進行富集、著色等處理。傳統的富集細胞的方法有離心富集法、生化捕獲法、膜過濾富集法等，其中離心法雖然能起到富集細胞的作用，但細胞體積、形態、重量不一，使得部分細胞被棄掉；生化捕獲法通常使用能結合細胞表面分子的生物分子或化學分子如抗體、配體、極性或非極性化學分子連接在固相上，再通過親和作用捕獲細胞達到富集作用，但捕獲效率受到分子間親和力、分子用量、反復清洗、非特異性吸附等影響，因此也會發生損失；膜過濾富集法是通過孔徑比所要捕獲的細胞小的濾膜進行過濾，細胞完全被濾膜截留在膜表面，是比較理想的方法富集方法，但由于過濾壓力難以控制導致部分細胞緊緊粘附膜上洗脫不下來，從而也會損失部分細胞。

對細胞進行著色使得醫護人員和研究人員可以從鏡檢中得出所需要細胞的檢驗結果，對體液樣本中的細胞常用的著色方法有細菌染料染色、熒光抗體結合細胞著色等，但常用的著色方法受人為因素影響較大；染色過程需要對玻片反復沖洗，一些固定不牢的細胞會被沖走；滴加著色液和洗脫時間等依靠操作者的經驗，隨意性較大，不能定量，難以重復；開放式的操作方式會使操作人員暴露于危險之中。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺陷和不足，提供了一種富集樣本中細胞并定量進行細胞著色的流體控制裝置。

本發明的另一個目的提供了一種能對著色步驟、著色液用量、著色時間進行標準化的細胞著色方法。

本發明的目的可以通過如下技術方案實現：富集細胞并對細胞著色的流體控制裝置，包括過濾腔體、轉盤、樣本室、預裝液室以及廢液室，過濾腔體可拆卸安裝于轉盤上，樣本室和多個預裝液室均勻安裝于過濾腔體的圓周方向，廢液室安裝于轉盤的底部。所述過濾腔體為空心圓柱結構，頂部設有過濾腔體旋轉柄，外側壁面上設有兩對稱凸位，在過濾腔體壁面上設有一個貫穿的過濾腔體孔，過濾腔體底部固定有微孔濾膜，過濾腔體設有與腔體大小相適應的活塞推拉桿；所述轉盤為空心圓柱結構，內側壁上設有與所述凸位相適應的兩對稱凹位；在轉盤內壁面上設有與過濾腔體孔相對應的轉盤孔道，所述轉盤孔道貫穿轉盤頂面和內側面；所述樣本室和預裝液室底部都設有孔，開孔位置與轉盤孔道在轉盤頂面的開孔相對應；所述廢液室頂部設有網狀結構。

作為優選的技術方案，所述過濾腔體孔設置于其中一個凸位上，所述轉盤孔道設置在與所述凸位對應的一個凹位上。將過濾腔體設置在凸位上，可以減少硅膠層的使用量，降低成本。

作為優選的技術方案，所述過濾腔體與轉盤連接處，轉盤與樣本室、預裝液室連接處都設置有硅膠層。硅膠層可以保證所述裝置內部的密封性。

作為優選的技術方案，所述網狀結構上設有砂芯片。當廢液室與轉盤連接時，砂芯片抵住微孔濾膜，可以更好地支撐微孔濾膜。

作為優選的技術方案，所述微孔濾膜固定在硅膠密封圈和裝膜環之間，所述硅膠密封圈與過濾腔體底部連接。微孔濾膜為徑跡蝕刻聚碳酸酯膜(PCTE膜)或徑跡蝕刻聚對苯二甲酸乙二醇酯膜(PETTE膜)。這種微孔濾膜為重離子加速打孔，微孔垂直穿過膜片，每個孔的孔徑固定大小，能保證全部截留比孔徑大的細胞。