[發明專利]一種鋅指核酸酶及其應用

在審

• 申請號: 201910841509.1
• 申請日: 2019-09-06
• 公開（公告）號: CN110484523A
• 公開（公告）日: 2019-11-22
• 發明（設計）人: 肖磊;吳昭;毛麗;劉婧睿
• 申請（專利權）人: 上海斯丹賽生物技術有限公司
• 主分類號: C12N9/22
• 分類號: C12N9/22;C12N15/55;C12N5/10
• 代理公司: 32346 江蘇瑞途律師事務所
• 代理人: 陳彬<國際申請>=<國際公布>=<進入國

1.一種分離的鋅指核酸酶，其特征在于：包括與TRAC基因中的第一靶位點結合的第一鋅指蛋白，與TRAC基因中的第二靶位點結合的第二鋅指蛋白，和切割結構域；

所述第一鋅指蛋白包含三個或三個以上的鋅指結構域；所述第二鋅指蛋白包含三個或三個以上的鋅指結構域；

所述第一鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號SEQ ID NO為2、5-7、2和19的氨基酸序列；所述第二鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、1-3和22的氨基酸序列；或

所述第一鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、5-7、2和19的氨基酸序列；所述第二鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為1-3和22的氨基酸序列；或

所述第一鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、5、11、7、2和9的氨基酸序列；所述第二鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、1-3和22的氨基酸序列；或

所述第一鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、5、11、7、2和9的氨基酸序列；所述第二鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為1-3和22的氨基酸序列；或

所述第一鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、5、15、7、2,和9的氨基酸序列；所述第二鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、1-3和22的氨基酸序列；或

所述第一鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、5、15、7、2和9的氨基酸序列；所述第二鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為1-3、22的氨基酸序列；或

所述第一鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為2、5、23和7、2和9的氨基酸序列；所述第二鋅指蛋白從N端到C端依次包括序列號為SEQ ID NO為1-3、22的氨基酸序列。

2.一種分離的鋅指核酸酶，其特征在于：包括與TRAC基因中的第一靶位點結合的第一鋅指蛋白，與TRAC基因中的第二靶位點結合的第二鋅指蛋白，和切割結構域；

所述第一鋅指蛋白包含三個或更多個的鋅指結構域；所述第二鋅指蛋白包含三個或更多個的鋅指結構域；

其中：

第一個鋅指蛋白為ZFL，第二個鋅指蛋白為ZFR，或

第一個鋅指蛋白為ZFL-5，第二個鋅指蛋白為ZFR-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFL-4，第二個鋅指蛋白為ZFR-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm1，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm1，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm1-5，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm1-5，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm1-4，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm1-4，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm2，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm2，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm2-5，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm2-5，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm2-4，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm2-4，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm3，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm3，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm3-5，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm3-4，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm4，第二個鋅指蛋白為ZFRm1，或

第一個鋅指蛋白為ZFLm4，第二個鋅指蛋白為ZFRm1-4，或

第一鋅指蛋白為ZFLm4-4，第二鋅指蛋白為ZFRm1-4。