[發明專利]一株枯草芽孢桿菌SL-19及其菌劑的制備方法和應用

在審

• 申請號: 201910837555.4
• 申請日: 2019-09-05
• 公開（公告）號: CN110511895A
• 公開（公告）日: 2019-11-29
• 發明（設計）人: 王可楠;安航;王宏杰;安德榮
• 申請（專利權）人: 陜西鄜州神鹿生態產業有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P5/00;C12R1/125
• 代理公司: 61214 西安弘理專利事務所
• 代理人: 韓玙<國際申請>=<國際公布>=<進入國

1.一株枯草芽孢桿菌SL-19，其特征在于，已于2019年07月08日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.18089。

2.一種如權利要求1所述的枯草芽孢桿菌SL-19的菌劑制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1)：菌種固體斜面活化培養

將枯草芽孢桿菌SL-19菌株接入固體斜面，在斜面培養基中培養，溫度為28-33℃，培養時間42-72h；

步驟2)：一級種子液擴大培養

將步驟1)的枯草芽孢桿菌SL-19接種到盛有1000ml一級種子液培養基中搖瓶培養24-36h，培養溫度26-31℃，轉速230-280r/min；

步驟3)：二級種子液發酵培養

按3％接種量將步驟2)種子液接種到200L種子發酵罐中，培養基采用優化培養基，在28-33℃保溫培養10-18h，同時輔以轉速230-280r/min，通氣量0.3-0.6m³/min，進行發酵培養；

步驟4)：發酵培養

按10％的接種量將步驟3)的種子液接種到2000L的大發酵罐中，培養基同步驟3)中的優化培養基，變溫變通氣量的培養條件下：先在28-33℃、通氣量0.3-0.6m³/min、培養24-36h，再升溫到37℃、通氣量加大到1.0-1.3m³/min、再培養48-72h，輔以轉速230-280r/min進行培養，當發酵菌液中枯草芽孢桿菌SL-19的活孢子數≥50億/ml時即可終止發酵，制得枯草芽孢桿菌SL-19菌劑。

3.如權利要求2所述的一種枯草芽孢桿菌SL-19菌劑的制備方法，其特征在于，所述步驟1)中的斜面培養基按重量百分比由以下成分組成：蛋白胨1.0-2.5％，酵母浸膏0.5-1.5％，葡萄糖1.0-2.0％，淀粉1.3-2.5％，氯化鈉1.0-1.5％，瓊脂9.0-14.5％，余量為水，自然pH值。

4.如權利要求2所述的一種枯草芽孢桿菌SL-19菌劑的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中一級種子液培養基按重量百分比由以下成分組成：蛋白胨1.0-2.5％，酵母浸膏0.5-1.5％，葡萄糖1.0-2.1％，淀粉1.3-2.5％，氯化鈉1.0-1.5％，余量為水，自然pH值。

5.如權利要求2所述的一種枯草芽孢桿菌SL-19菌劑的制備方法，其特征在于，所述步驟3)和步驟4)所采用的優化培養基按重量百分比由以下成分組成：玉米粉1.5-2.5％，葡萄糖1.0-2.1％，麩皮粉0.3-1.0％，酵母浸膏0.3-0.8％，磷酸氫二銨0.02-0.04％，磷酸氫二鈉0.03-0.09％，磷酸二氫鉀0.06-0.09％，硫酸鈉0.02-0.04％，硝酸鈉0.02-0.04％，硫酸鎂0.02-0.04％，余量為水，pH值調至6.9-7.3。

6.一種如權利要求2所述的枯草芽孢桿菌SL-19菌劑的應用，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌SL-19菌劑在防治植物根結線蟲病害中的應用。

7.一種如權利要求2或6所述的枯草芽孢桿菌SL-19菌劑的應用，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌SL-19菌劑在防治西瓜根結線蟲病害中的應用。

8.一種如權利要求2所述的枯草芽孢桿菌SL-19菌劑的應用，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌SL-19菌劑在作物培育中的應用。

9.一種如權利要求2或8所述的枯草芽孢桿菌SL-19菌劑的應用，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌SL-19菌劑在西瓜培育中的應用。