[發(fā)明專利]一種與茶樹次級代謝產(chǎn)物含量連鎖的位于類受體蛋白激酶基因上的分子標記位點及其應(yīng)用

有效

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• 申請日: 2019-09-04
• 公開（公告）號: CN110468230B
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 方開星;吳華玲;李波;潘晨東;王秋霜;李紅建;姜曉輝;秦丹丹;黃華林
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發(fā)明公開了一種位于類受體蛋白激酶基因上與茶樹次級代謝產(chǎn)物含量連鎖的分子標記位點及其應(yīng)用，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了位于茶樹基因組Scaffold4239:309117上的與茶樹(+)?兒茶素、咖啡堿和沒食子兒茶素沒食子酸酯含量相關(guān)的SNP分子標記位點，AA基因型樣本對應(yīng)的茶湯干物質(zhì)中茶樹次級代謝產(chǎn)物((+)?兒茶素、咖啡堿和沒食子兒茶素沒食子酸酯)含量與GG和GA基因型樣本相比具有極顯著差異。進一步建立檢測該位點的檢測方法，可用于評價茶樹的(+)?兒茶素、咖啡堿和沒食子兒茶素沒食子酸酯的含量，以進一步用于高茶樹次級代謝產(chǎn)物茶樹資源篩選及分子育種，具有很大的研究價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子遺傳育種技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種與茶樹次級代謝產(chǎn)物含量連鎖的位于類受體蛋白激酶基因上的分子標記位點及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

茶(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)屬于山茶科山茶屬茶組，起源于中國的西南地區(qū)，距今有5000多年的栽培歷史。茶葉與咖啡、可可并稱為世界三大無酒精飲料，有著重要的經(jīng)濟價值，并對社會和文化有著重要影響。

作為葉用植物，茶樹新稍中的特征性次級代謝產(chǎn)物咖啡堿和兒茶素類化合物是茶葉滋味的主要影響因子。

咖啡堿是三甲基黃嘌呤的衍生物，是茶葉中主要的生物堿，占茶鮮葉的2％～4％，是茶湯主要苦味物質(zhì)。

(+)-兒茶素((+)-catechin，C)屬于兒茶素類化合物，是茶葉的重要成分，具有防治心血管疾病、預(yù)防癌癥等多種功能。它為還原性多元酚類物質(zhì)，在水溶液中易被空氣氧化，常用作抗氧化劑。右旋兒茶精還有降低毛細血管的通透性、止瀉、止血、抗病毒、殺真菌、抑制ACE及預(yù)防胃潰瘍等多種作用。

沒食子兒茶素沒食子酸酯(Gallocatechin gallate，GCG)同樣屬于兒茶素類化合物，是酚酸類化合物，能顯著抑制細胞的黑色素生成和酪氨酸酶的活性。

目前茶樹育種主要通過常規(guī)方法進行，從野生群體、雜交后代中選擇優(yōu)良單株進行系統(tǒng)選育。該方法時間長、效率低，使得新品種更新?lián)Q代慢，不能快速滿足大眾對新產(chǎn)品的需求。分子標記輔助育種由于可以在苗期對育種材料進行選擇，可顯著提高育種效率。植物類受體蛋白激酶(Receptor-likeproteinkinases，RL Ks)具有內(nèi)在的激酶活性，是植物許多信號傳導(dǎo)途徑中的關(guān)鍵組分。典型的植物RLKs具有一個胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)激酶區(qū)。LRR基序參加蛋白-蛋白互作，在分子識別過程中發(fā)揮重要的作用。目前并沒有RLK參與調(diào)控茶樹次級代謝產(chǎn)物含量的報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種位于類受體蛋白激酶基因上與茶樹次級代謝產(chǎn)物含量連鎖的分子標記位點及其應(yīng)用。

本發(fā)明的第一個目的是提供一種茶樹次級代謝產(chǎn)物含量數(shù)量性狀連鎖的分子標記。

本發(fā)明的第二個目的是提供所述分子標記在評價茶樹次級代謝產(chǎn)物含量中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第三個目的是提供所述分子標記的引物。

本發(fā)明的第四個目的是提供所述引物在評價茶樹次級代謝產(chǎn)物含量中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第五個目的是提供一種評價茶樹次級代謝產(chǎn)物含量的試劑盒。

本發(fā)明的第六個目的是提供一種評價茶樹次級代謝產(chǎn)物含量的方法。

本發(fā)明的第七個目的是提供所述分子標記SNP位點、所述引物、或所述試劑盒在分子輔助育種中的應(yīng)用。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的：