[發(fā)明專利]一種鈣螯合肽及其制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910826230.6
• 申請日: 2019-09-03
• 公開（公告）號: CN110627896B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發(fā)明（設計）人: 苗建銀;廖婉雯;曹庸
• 申請（專利權）人: 華南農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12P21/06;C07K1/20;A23L33/165;A23L33/18;A23L2/52;A61K38/39;A61P3/02
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳娟

本發(fā)明涉及一種鈣螯合肽及其制備方法和應用。所述鈣螯合肽的氨基酸序列：FDHIVY。本發(fā)明提供的鈣螯合肽安全無毒，與傳統(tǒng)補鈣劑相比具有更好的理化活性，其鈣螯合能力達35.73mg/g；可在提高鈣在人體中的吸收和生物利用率的同時，也可補充膠原蛋白肽，且可促進Caco?2小腸上皮細胞中鈣吸收和轉運，用作藥物開發(fā)以及生物補鈣劑的原料。本發(fā)明提供的制備方法成功得到該鈣螯合肽，可充分利用魚產(chǎn)品資源，操作簡單，為羅非魚骨的高值化利用提供了新途徑。

技術領域

本發(fā)明屬于功能性保健食品制備技術領域，具體涉及一種鈣螯合肽及其制備方法和應用。

背景技術

鈣元素是骨礦物質(zhì)的主要成分，人體主要通過攝入食物來獲取鈣，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，由鈣攝入不足引起的鈣代謝失衡，是人類各年齡段人群所發(fā)生的多種疾病的誘因。目前，鈣營養(yǎng)不足已經(jīng)成為世界性的營養(yǎng)現(xiàn)象，成人的日常推薦鈣攝入量一般為800mg/d，然而由于我國飲食結構問題，人民膳食鈣的攝入量較為低下，遠遠達不到日常推薦攝入量的要求。

鈣離子能夠與肽形成具有環(huán)狀結構的絡合物，其穩(wěn)定性較高，并能夠使鈣離子以螯合物形式被吸收利用，提高其生物利用率，同時也有利于鈣離子的釋放，是作為生物補鈣劑的良好選擇。我國海產(chǎn)資源豐富，如羅非魚的產(chǎn)量和出口量均居世界前列，且由于產(chǎn)業(yè)結構的原因其加工利用率較為低下，加工過程中所產(chǎn)生的下腳料則是制備鈣螯合肽的良好原料來源。鈣螯合肽是利用無機鈣離子與多肽在一定條件下反應制備所得，目前已有多種制備方法(高勝利等，1999)，如水體系合成法、干粉體系合成法、電解合成法(劉建睿等，1999)，其中又以水體系合成法應用最廣泛，其優(yōu)點有操作簡便、設備簡單、螯合率高、所得產(chǎn)物具有良好的水溶性，比較適用于廣泛的工業(yè)化生產(chǎn)(梁漢縈，2007)。而對金屬螯合肽的分離純化方法有超濾、離子交換色譜、凝膠過濾色譜和反相高效液相色譜等，通過各級分離純化可以制備出最強活性的鈣螯合肽單體。目前已有越來越多的工作者進行相關的從海產(chǎn)品下腳料中如鱈魚、羅非魚的骨和皮中提取膠原蛋白進行持鈣活性的研究，并已取得了良好進展。

因此，從海產(chǎn)品下腳料中研究出具有高鈣螯合活性的鈣螯合肽具有重要的研究意義和經(jīng)濟價值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服人體對鈣元素的攝入量不足的缺陷或不足，提供一種鈣螯合肽。本發(fā)明提供的鈣螯合肽具有較好的鈣螯合活性，其鈣螯合能力達35.73mg/g，且可促進Caco-2細胞單層中鈣轉運，可用于制備補鈣制劑或功能性飲料，滿足人體對鈣元素攝入量的需求。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述鈣螯合肽的制備方法。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述鈣螯合肽在制備補鈣制劑或功能性飲料中的應用。

為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種鈣螯合肽，所述鈣螯合肽的氨基酸序列為：FDHIVY(Phe-Asp-His-Ile-Val-Tyr)。

本發(fā)明提供的鈣螯合肽安全無毒，與傳統(tǒng)補鈣劑相比具有更好的理化活性，其鈣螯合能力達35.73mg/g，且可促進Caco-2細胞單層中鈣轉運，可提高鈣在人體中的吸收和生物利用率，用作藥物開發(fā)以及生物補鈣劑的原料。

優(yōu)選地，所述鈣螯合肽的分子量為793.3888Da。

上述鈣螯合肽的制備方法，包括如下步驟：

S1：將羅非魚骨架進行酶解脫肉，堿洗脫脂，脫鈣處理和酸處理后得到羅非魚骨膠原蛋白；

S2：將S1所得羅非魚骨膠原蛋白酶解后，滅酶，離心取上清液凍干；

S3：利用制備型反相高效液相色譜進行多級逐級分離純化后，利用分析型高效液相分離即得到所述鈣螯合肽。

本發(fā)明為以鈣螯合活性為評價指標，采用制備型反相高效液相色譜和分析型高效液相色譜對羅非魚骨膠原蛋白酶解產(chǎn)物進行分離純化，即得到羅非魚骨膠原蛋白源的鈣螯合肽。