[發明專利]一種利用靶向定位結合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法在審
| 申請號： | 201910825809.0 | 申請日： | 2019-09-03 |
| 公開（公告）號： | CN110531060A | 公開（公告）日： | 2019-12-03 |
| 發明（設計）人： | 張英華;于鑫欣;趙鈞晗;張釙;徐曉娟;殷佳藝 | 申請（專利權）人： | 東北農業大學 |
| 主分類號： | G01N33/53 | 分類號： | G01N33/53 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 150030 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 乳球蛋白 致敏性 修飾 靶向定位 酶水解 靶向 地衣芽孢桿菌 分子動力學 關鍵氨基酸 乳制品加工 蛋白酶 分子模擬 抗原表位 抗原活性 復合物 申請 優化 | ||
1.一種利用靶向定位結合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：(1)分子對接，使用抗體建模模塊進行免疫球蛋白IgG抗體建模，實現抗體互補決定簇優化；(2)分子動力學，對復合物進行分子動力學優化；(3)能量分析，對復合物進行能量分解分析，確定β-乳球蛋白的關鍵抗原位點；(4)特異性酶水解，選取五種特異性蛋白酶：地衣芽孢桿菌蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、葡萄球菌蛋白酶、胰蛋白酶和嗜熱菌蛋白酶分，別對β-乳球蛋白進行水解修飾，采用間接競爭酶聯免疫法測定水解產物中抗原含量，根據β-乳球蛋白的抗原活性降低程度選擇水解酶。
2.根據權利要求1所述的一種利用靶向定位結合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法，其特征在于，所述的優化后的IgG抗體模型的抗體互補決定簇為A26-A37、A55-A57、A95-A102、B250-B254、B270-B275、B317-B324。
3.根據權利要求1所述的一種利用靶向定位結合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法，其特征在于，所述的β-乳球蛋白的模擬抗原表位為Tyr20、Gln35、Arg40、Pro126、Glu127、Asp130、Phe151、Asn152、Pro153、Thr154、Gln155、Glu157、Hie161和Ile162。
4.根據權利要求1所述的一種利用靶向定位結合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法，其特征在于，所述的β-乳球蛋白的關鍵抗原位點為Phe151～Glu157。
5.根據權利要求1所述的一種利用靶向定位結合酶水解降低β-乳球蛋白致敏性的方法，其特征在于，所述的β-乳球蛋白抗原表位的關鍵氨基酸為Gln155，使用地衣芽孢桿菌蛋白酶對Gln155關鍵氨基酸進行靶向修飾，有效降低β-乳球蛋白的抗原活性，實現靶向修飾降低β-乳球蛋白致敏性這一目標。
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