[發(fā)明專利]玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM2及其編碼基因和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910825318.6
• 申請日: 2019-09-02
• 公開（公告）號: CN110527677B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姚斌;羅會穎;于心蕊;涂濤;柏映國;黃火清;蘇小運(yùn);王亞茹;王苑;張杰
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12N15/55;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84
• 代理公司: 北京法信智言知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11737
• 代理人: 劉靜榮

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM2及其編碼基因和應(yīng)用。玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM2通過將野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的160位堿基進(jìn)行點(diǎn)突變得到。本發(fā)明提供了一種適用于能源、食品和飼料等領(lǐng)域的高酶活力玉米赤霉烯酮水解酶，突變體的酶活力是野生型的3.4倍，其具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM2及其編碼基因和應(yīng)用。

背景技術(shù)

玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEN)是谷物和農(nóng)作物中常見的一種具有類雌激素樣作用的非甾體類霉菌毒素，又被稱為F-2毒素，主要由禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)、黃色鐮刀菌(Fusarum culmorum)和克地鐮刀菌(Fusarum crookwellense)等真菌產(chǎn)生，在生產(chǎn)實踐中對畜牧業(yè)造成嚴(yán)重的危害。

目前，ZEN降解的常用方法主要有化學(xué)法、物理法和生物法。化學(xué)法和物理法主要是通過破壞ZEN苯環(huán)結(jié)構(gòu)、修飾基團(tuán)或吸附作用吸附毒素，以減少或去除毒素，但這些方法不僅成本高，效率低，還會造成營養(yǎng)物質(zhì)流失，甚至造成二次污染。生物法主要是微生物吸附和微生物降解兩種。微生物降解是通過微生物代謝所產(chǎn)生的一種或多種酶協(xié)作對毒素進(jìn)行降解，條件溫和，特異性強(qiáng)，不破壞原有營養(yǎng)成分且效率高，是一種環(huán)保、高效、實用性強(qiáng)的處理方法。但目前所發(fā)現(xiàn)的赤霉烯酮水解酶活性均較低，阻礙了赤霉烯酮水解酶的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)及應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM2。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述突變體的編碼基因。

本發(fā)明的再一目的在于提供含有上述編碼基因的重組表達(dá)載體。

本發(fā)明的再一目的在于提供含有上述編碼基因的重組菌株。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM2的制備方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM2的應(yīng)用。

根據(jù)本發(fā)明的具體實施方式，本發(fā)明的突變體ZHDM2由野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的160位堿基由異亮氨酸突變?yōu)槔野彼岬玫剑吧陀衩壮嗝瓜┩饷竄H607的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示：

MSTTRATKTVTTKDGIKWHVEQEGNGPDIVLVPDGLGECQMFDKPMSIIAASGFRVTTFDMPGMSRSRDAPPETYRDVTGHKLAGYVDTLLEELKIPIASVWGCSSGATTVLALCAAFPERVRNAMPHELPTVNPASVTGMEEKDPAVISQEMAAVSRSISGGTEAWDALGPEVHARLHDNYVRWARGYPVTIPPSAPTKSEVLHKRPVDWTVGGGTPTAMFFDNIVIAVKEGLNIGLLPGGHFPYVSHPEAFAEYVVETCRKYI

突變體ZHDM2具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，由265個氨基酸組成。

SEQ ID NO.2：

MSTTRATKTVTTKDGIKWHVEQEGNGPDIVLVPDGLGECQMFDKPMSIIAASGFRVTTFDMPGMSRSRDAPPETYRDVTGHKLAGYVDTLLEELKIPIASVWGCSSGATTVLALCAAFPERVRNAMPHELPTVNPASVTGMEEKDPAVISQEMAAVSRSYSGGTEAWDALGPEVHARLHDNYVRWARGYPVTIPPSAPTKSEVLHKRPVDWTVGGGTPTAMFFDNIVIAVKEGLNIGLLPGGHFPYVSHPEAFAEYVVETCRKYI