[發(fā)明專利]鑒定蕓薹屬蔬菜種間雜種及后代材料A06和C07染色體分離情況的分子標(biāo)記和方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910823218.X
• 申請(qǐng)日: 2019-09-02
• 公開（公告）號(hào): CN110438254B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李錫香;張曉輝;宋江萍;王海平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 成都方圓聿聯(lián)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 51241
• 代理人: 胡文莉

本發(fā)明提供一種鑒定蕓薹屬蔬菜種間雜種及后代材料A06和C07染色體分離情況的SSR分子標(biāo)記和方法，屬于植物遺傳育種領(lǐng)域。該分子標(biāo)記能快速、準(zhǔn)確的鑒定出蕓薹屬A基因組(如白菜、紅菜苔等)與C基因組(如芥藍(lán)、埃塞俄比亞芥(含C基因組的))植物的種間雜種及其后代材料。該方法能鑒定蕓薹屬A基因組與C基因組植物遠(yuǎn)緣雜交及其回交后代，可以拓展蕓薹屬蔬菜的遺傳資源，轉(zhuǎn)育新性狀，豐富蔬菜類型，豐富人民的日常膳食營(yíng)養(yǎng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及遺傳育種領(lǐng)域，具體而言，涉及遠(yuǎn)緣雜種植物鑒定和選育方法。

背景技術(shù)

遠(yuǎn)緣雜交是創(chuàng)制植物新種質(zhì)、拓展育種資源的重要手段。由于物種生殖隔離，遠(yuǎn)緣雜交往往需要人工授粉和胚拯救等技術(shù)，耗時(shí)費(fèi)力，且需要一定科學(xué)訓(xùn)練。在遠(yuǎn)緣雜交過(guò)程中，由于去雄不徹底、雌配子發(fā)育成植株，以及其他原因可能造成假雜種植株的產(chǎn)生。因而，遠(yuǎn)緣雜交獲得的植株需要通過(guò)分子、細(xì)胞學(xué)等方法檢測(cè)是否為真雜種。遠(yuǎn)緣雜種的自交、回交后代需要通過(guò)分子或細(xì)胞學(xué)方法追蹤染色體或染色體片段，用以創(chuàng)制異源多倍體、染色體附加系、導(dǎo)入系等遺傳材料。與細(xì)胞學(xué)方法相比，分子標(biāo)記具有快速、操作簡(jiǎn)單、對(duì)實(shí)驗(yàn)操作者技術(shù)要求低、不需要昂貴儀器、可用于大群體篩查等優(yōu)點(diǎn)。隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，高通量測(cè)序和生物芯片也可以用于遠(yuǎn)緣雜種的分子檢測(cè)。但是，由于簡(jiǎn)單快速和成本低廉等原因，分子標(biāo)記仍然在遠(yuǎn)緣雜種快速篩選和大規(guī)模群體初篩上具有使用價(jià)值。

蕓薹屬蔬菜包含A、B、C三個(gè)基因組，其中A基因組蔬菜有白菜、紅菜苔等，C基因組蔬菜有芥藍(lán)、甘藍(lán)等，AB基因組蔬菜有芥菜，BC基因組作物有埃塞俄比亞芥，AC基因組作物有油菜。這些蔬菜和油料作物在我國(guó)廣泛栽培。通過(guò)A和C基因組間遠(yuǎn)緣雜交及回交轉(zhuǎn)育可以拓展蔬菜遺傳瓶頸，創(chuàng)制優(yōu)良蔬菜遺傳資源，轉(zhuǎn)育稀缺的抗性基因，改良蔬菜營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。紅菜苔屬于白菜的一個(gè)變種(A基因組)，以湖北省武漢市洪山區(qū)出產(chǎn)的品質(zhì)最優(yōu)。是長(zhǎng)江流域的一種特色薹用蔬菜。芥藍(lán)屬于起源于我國(guó)的甘藍(lán)類蔬菜(C基因組)，具有抗性好、品質(zhì)優(yōu)、采收快的優(yōu)點(diǎn)。是我國(guó)南方地區(qū)的重要薹用蔬菜。通過(guò)芥藍(lán)和紅菜苔遠(yuǎn)緣雜交，可以拓展芥藍(lán)和紅菜苔的遺傳資源，轉(zhuǎn)育新性狀，豐富蔬菜類型，豐富人民日常膳食營(yíng)養(yǎng)。

白菜屬于起源于我國(guó)的十字花科蔬菜，具有種類多、品質(zhì)優(yōu)、產(chǎn)銷廣的優(yōu)點(diǎn)。埃塞俄比亞芥是起源于非洲油料作物，具有優(yōu)良的抗病、抗逆特性。白菜屬于A基因組，埃塞俄比亞芥屬于BC基因組；通過(guò)遠(yuǎn)緣雜交合成ABC基因組植物具有重要的農(nóng)業(yè)應(yīng)用前景。通過(guò)雜交后回交轉(zhuǎn)育，將A、B、C基因組間染色體重組，將提高白菜和油菜的遺傳多樣性和抗病、抗逆潛力。

蕓薹屬A06和C07染色體是部分同源(homeologous)染色體。二者之間既含有部分同源區(qū)段，也含有大量物種分化后產(chǎn)生的特異基因。利用A06和C07染色體在雜交后代中的重組可以獲得新的農(nóng)藝性狀，提高蔬菜和油料作物的抗病、抗逆、及營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題為：如何提供一種鑒定蕓薹屬蔬菜種間雜種及后代材料A06 和C07染色體分離情況的分子標(biāo)記和方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：

鑒定蕓薹屬蔬菜種間雜種及后代材料A06和C07染色體分離情況的SSR分子標(biāo)記，該 SSR分子標(biāo)記由引物C07D擴(kuò)增得到，引物C07D的前向引物序列為C07D-F:5’-GGAGAAGAAAACAGCGATGC-3’(SEQ ID No.1)，引物C07D的后向引物序列為C07D- R:5’-GGAATAGCTCTTGACGCTCG-3’(SEQ ID No.2)。

該分子標(biāo)記PCR片段預(yù)期長(zhǎng)度：190-210bp。真實(shí)的，蕓薹屬蔬菜A基因組中擴(kuò)增片段的預(yù)期長(zhǎng)度為205bp，C基因組中的擴(kuò)增片段預(yù)期長(zhǎng)度為193bp。應(yīng)當(dāng)知道，不同品種間SSR重復(fù)數(shù)可能不同，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度在不同品種間可以有差異。