[發明專利]玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201910823208.6
• 申請日: 2019-09-02
• 公開（公告）號: CN110564707B
• 公開（公告）日: 2021-11-05
• 發明（設計）人: 姚斌;羅會穎;于心蕊;涂濤;柏映國;黃火清;蘇小運;王亞茹;王苑;張杰
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N9/14
• 分類號: C12N9/14;C12N15/55;C12N15/81;C12N1/19;A23L5/20;C12R1/84
• 代理公司: 北京法信智言知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11737
• 代理人: 劉靜榮

本發明屬于農業生物技術領域，具體涉及玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1及其編碼基因和應用。玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1，通過將野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的第136?142位氨基酸突變得到。本發明的玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1的酶活力是野生型的2.9倍，因此，本發明高酶活力突變體能夠滿足能源、食品和飼料等領域中對于玉米赤霉烯酮降解活性的要求，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明屬于農業生物技術領域，具體涉及玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1及其編碼基因和應用。

背景技術

玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)又被稱為F-2毒素，它是由多種鐮刀菌屬產生的非甾體、具有類雌激素性質的霉菌毒素。ZEN的雌激素效應毒性不僅僅表現在損害雌性動物生殖能力，而且能引起雄性動物生殖系統的損害。此外，高劑量ZEN還具有肝腎毒性、腸道毒性、免疫毒性及其霉菌毒素的聯合毒性，嚴重危害動物健康。

微生物降解法消除ZEN污染是利用微生物在代謝過程中產生的酶與ZEN作用，破壞ZEN分子的毒性基團，使其被降解或轉化為無毒產物的過程。生物降解法降解ZEN專一性強、ZEN分子被轉化效率高、不會引起環境污染，并且能夠保留飼料原有營養價值。但目前所發現的玉米赤霉烯酮水解酶活性均較低，阻礙了玉米赤霉烯酮水解酶的大規模工業化生產及應用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1。

本發明的再一目的在于提供上述突變體的編碼基因。

本發明的再一目的在于提供含有上述編碼基因的重組表達載體。

本發明的再一目的在于提供含有上述編碼基因的重組菌株。

本發明的再一目的在于提供上述玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1的制備方法。

本發明的再一目的在于提供上述玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1的應用。

根據本發明的具體實施方式，所述玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1通過將野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的第136-142位氨基酸由ASVTGME突變為DILLHIH得到，其中，野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示：

MSTTRATKTVTTKDGIKWHVEQEGNGPDIVLVPDGLGECQMFDKPMSIIAASGFRVTTFDMPGMSRSRDAPPETYRDVTGHKLAGYVDTLLEELKIPIASVWGCSSGATTVLALCAAFPERVRNAMPHELPTVNPASVTGMEEKDPAVISQEMAAVSRSISGGTEAWDALGPEVHARLHDNYVRWARGYPVTIPPSAPTKSEVLHKRPVDWTVGGGTPTAMFFDNIVIAVKEGLNIGLLPGGHFPYVSHPEAFAEYVVETCRKYI

玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示：

MSTTRATKTVTTKDGIKWHVEQEGNGPDIVLVPDGLGECQMFDKPMSIIAASGFRVTTFDMPGMSRSRDAPPETYRDVTGHKLAGYVDTLLEELKIPIASVWGCSSGATTVLALCAAFPERVRNAMPHELPTVNPDILLHIHEKDPAVISQEMAAVSRSISGGTEAWDALGPEVHARLHDNYVRWARGYPVTIPPSAPTKSEVLHKRPVDWTVGGGTPTAMFFDNIVIAVKEGLNIGLLPGGHFPYVSHPEAFAEYVVETCRKYI

玉米赤霉烯酮水解酶突變體ZHDM1編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示：