[發明專利]一種海參巖藻多糖及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910821856.8
• 申請日: 2019-09-02
• 公開（公告）號: CN110437288B
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 李國云;于廣利;李超;牛慶鳳;蔡超;郝杰杰
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C07H1/08
• 分類號: C07H1/08;C07H11/00;A61P7/02;A61P7/00
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

1.海參巖藻多糖在制備造血刺激劑的藥物中的應用，其特征在于：所述海參巖藻多糖能夠加速環磷酰胺誘導的白細胞和中性粒細胞的恢復；

所述海參巖藻多糖的化學結構式如式（Ⅰ）所示：

（Ⅰ）

所述海參巖藻多糖重的分子量為103.1±2.8 kDa，硫酸根的質量比為39.5±1.4 %，具有由α-1→3連接的巖藻糖組成的四糖重復單元，所述四糖重復單元為：

[→3-α-l-Fucp-1→3-α-l-Fucp2(OSO₃^?)-1→3-α-l-Fucp2(OSO₃^?)-1→3-α-l-Fucp2,4(OSO₃^?)-1→]；所述海參巖藻多糖來源于愛琴海海參Holothuria polii；所述海參巖藻多糖中巖藻糖的質量比為95.7%；

所述海參巖藻多糖的制備方法，包括如下步驟：

（1）將干海參粉末于體積比為4~5：1的氯仿/甲醇混合溶液中浸泡脫脂，離心后去除上清液后復溶于水；

（2）然后在蛋白酶55~75℃下反應20~30h，離心去除沉淀，再用1~3倍體積的氯化十六烷基吡啶水溶液沉淀多糖；所述蛋白酶為木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、組織蛋白酶、羧肽酶中的一種或多種

（3）再次離心后去除上清液，將沉淀后的多糖再復溶于10~20倍體積的氯化鈉水溶液和乙醇的混合溶液中，用2~4倍體積的乙醇沉淀；所述氯化鈉水溶液的濃度為3mol/L~5mol/L；

（4）離心烘干得到固體粉末，溶于水后超濾脫鹽，濃縮凍干得到多糖粗品；

（5）將步驟（4）所得多糖粗品分級分離，以NaCl水溶液為流動相進行洗脫，經強陰離子交換柱分離純化，透析除鹽、凍干；

（6）將所得凍干組分以鹽溶液為流動相，使用凝膠過濾色譜柱進一步純化，苯酚/硫酸法檢測，透析后減壓濃縮、凍干，即得所述巖藻多糖；所述鹽溶液為醋酸銨或碳酸氫銨；所述凝膠過濾的分離介質為葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、丙烯葡聚糖凝膠或交聯瓊脂糖凝膠。